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血清尿素测定 尿素的测定方法 尿素（urea）是氨基酸分解代谢的最终产物，在肝脏合成，通过血液运至肾脏，从尿中排除。检测尿素的方法有二乙酰一肟法和酶法。二乙酰一肟法操作简便，仍为大多数基层医疗单位所采用。 脲酶波氏法是我们今天实验课所选用的酶法。 实验原理 脲酶水解样本中的尿素，产生两分子氨和一分子的二氧化碳。氨在碱性条件下与酚及次氯酸反应，在亚硝基铁氰化钠催化作用下生成蓝色化合物，与经过同样处理的校准液进行比较，即可计算出样本中尿素的含量。（终点法） 尿素在尿素酶催化下，水解生成氨和二氧化碳，氨在α-酮戊二酸和NADH（还原型辅酶Ⅰ）存在下，经谷氨酸脱氢酶（GLDH）催化生成谷氨酸。同时NADH被氧化成NAD+。NADH在波长340nm处有吸收峰，测定此处吸光度的下降速率，既可反映尿素的含量。（酶速率法） 实验操作 测定 校准 空白 样本（微升） 10 校准液（微升） 10 蒸馏水（微升） 10 试剂R1（微升） 50 50 50 试剂R3（微升） 1000 1000 1000 混匀，置37摄氏度水浴恒温5分钟 试剂R4（微升） 1000 1000 1000 混匀，置37摄氏度水浴恒温5分钟，600纳米波长，以空白管调零，测定各管吸光度值。 准备：每瓶R1以2.5mlR2复溶 参考范围及计算 【计算】 尿素（mmol/L）＝A测/A标×7.14mmol/L 【参考范围】 血清尿素2.68～8.20mmol/L，相当于尿素氮（BUN）5.3～16.4mmol/L。 临床意义 1.血清尿素浓度增高 ⑴生理性增高：见于高蛋白饮食。 ⑵病理性增高：①肾前性：如失水、水肿、循环功能不全、心功能不全，休克等引起肾血流量减少，肾小球滤过率减低而使血中尿素潴留；②肾性：急性肾小球肾炎、肾病晚期、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎都可出现血中尿素含量增高。③肾后性疾患：如前列腺肿大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤致使尿道受压等都可能使尿路阻塞引起血液中尿素含量增加。 2.血清尿素减少 较少见，尿素减少表示严重肝病，如肝炎合并广泛性肝坏死。 方法局限性 1.尿液尿素也可用此法测定，但因浓度高（超过28mmol/L），需先用去离子水稀释。 再乘以稀释倍数。 2.试剂变混浊或空白吸光度大于0.150，将不能使用，应弃去。 3.所用试验器材必须清洁，避免氨污染。 4.试剂含化学成分，应避免氨污染。