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实验一:观察 DNA、 RNA在细胞中的分布(必修一 P26)
一.实验目的: 初步掌握观察 DNA和 RNA在细胞中分布的方法
二.实验原理
1. 甲基绿 +DNA 绿色
两种试剂不是单独使用,应混合使用
吡罗红 +RNA
红色
2.
8%
盐酸:改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的
几种液体
DNA和蛋白质分离,有利于
DNA与染色剂结合。
的作用
溶液:保持口腔上皮细胞正常形态
0.9%NaCl
蒸馏水:配制染色剂,冲冼载玻片
三.方法步骤
操作步骤
注意问题
解释
载玻片要洁净,滴一滴质量分数为
防止污迹干扰观察效果
0.9%的 NaCl 溶液(生理盐水)
保持细胞原有形态
取口腔上皮
用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁
消毒为防止感染, 漱口避免取材失败
细胞制片
上轻刮几下取细胞
杀死并固定装片;烘干时应来回移
将载玻片在酒精灯下烘干
动,防止受热不均破裂
将烘干的载玻片放入质量分数为
8%
①改变细胞膜的通透性, 加速染色剂
进入细胞
水解
的盐酸( HCl)溶液中,用 300C 水浴
②促进染色体的 DNA与蛋白质分离而
保温 5min
被染色,细胞为死细胞
冲冼涂片
用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片
10S
洗去残留在外的盐酸
缓水流:防止细胞被冲走
用吸水线除去多余的水分
染色
2 滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色 5min
吸取染色剂
除去多余的染色剂并盖上盖玻片
先低倍镜观察:选择染色均匀、色泽
观察
浅的区域,移至视野
使观察效果最佳
中央,调节清晰
后才换用高倍物镜观察:
现象
细胞核大部分被染成绿色
细胞核也有小部分被染成红色
细胞质大部分被染成红色
细胞质也有小部分被染成绿色
结论
DNA主要集中分布于细胞核中
在细胞质中也有
DNA分布
RNA主要集中分布于细胞质中
在细胞核中也有
RNA分布
第1页共21页
实验二: 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一
P18)
一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
二.实验原理: 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的
颜色反应 。
1. 还原糖 (如葡萄糖、果糖、麦芽糖
) + 斐林试剂 水浴加热
砖红色沉淀 。
斐林试剂
甲液: 0.1g/ml NaOH
溶液
使用时:甲乙液等量混匀后立即使用
乙液: 0.05g/ml CuSO
4 溶液
实质: 是还原糖(全部单糖、麦芽糖、果糖、乳糖)与新制的
Cu (
OH) 2 反应生成砖红
色氧化亚铜( Cu2 O)。
2. 脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)
。
3. 蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应
。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性
NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的
Cu2+作用,产生紫色反应。
)
双缩脲试
A液: 0.1g/ml NaOH
溶液
使用时: 先加 A 液后加 B 液
液: 0.01g/ml CuSO 4 溶液
B
实质: 在碱性条件下, 肽键结构与铜离子
反生络合反应,生成紫色络合物。
淀粉遇碘变蓝色。三.实验材料
1.做 还原糖鉴定 实验:应选 含糖高,颜色为白色或近白色的
植物组织,如苹果、梨。(
因
为组织的颜色较浅,最好无色,防止颜色干扰且易于观察。
)
2.做 脂肪的鉴定 实验:应选富 含脂肪的 种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡
3~4
小时(也可用蓖麻种子)。
3.做 蛋白质的鉴定 实验:可用 富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等
。
四、实验试剂
斐林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂、体积分数为
50%的酒精溶液,碘液、蒸
馏水。
五、方法步骤
(一)可还原糖的鉴定
操作方法
注意问题
解 释
苹果或梨 组织液 必须临时
制
1.
制备组织样液。
备。
因苹果多酚氧化酶含量高,
组织液很易被氧化成褐色,
(去皮、切块、研磨、过滤)
要取 组织的颜色较浅,最好无
将产生的颜色掩盖。
色,易于观察。
2.
取 1 支试管,向试管内注
入 2mL组织样液。
应将组成斐林试剂的甲液、乙
3.
向试管内注入 1mL新制的
液分别配制、储存,使用前才
斐林试剂很不稳定,易分
斐林试剂,振荡(此时呈
将甲、乙液等量混匀成斐林试
解。
现斐林试剂的颜色: 浅蓝
剂;
色)。
切勿将甲液、乙液分别加入苹
试管放在盛有 50-65 0C 温 最好用试管夹夹住试管上部,水的大烧杯中, 加热约 2 分 使试管底部不触及烧杯底部,
钟 ,观察到溶液颜色:浅蓝 试管口不朝向实验者。
色 → 棕色 → 砖红色(沉 也可用酒 精灯对 试管直接 加
淀) 热。
留适当样液与反应后溶液做对照,结论:组织样液中含有还原糖
甲、乙液分别加入时可能无防止试管内的溶液冲出试管,造
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