高中生物课本19个实验归纳与整理.docxVIP

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实验一:观察 DNA、 RNA在细胞中的分布(必修一 P26) 一.实验目的: 初步掌握观察 DNA和 RNA在细胞中分布的方法 二.实验原理 1. 甲基绿 +DNA 绿色 两种试剂不是单独使用,应混合使用 吡罗红 +RNA 红色 2. 8% 盐酸:改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的 几种液体 DNA和蛋白质分离,有利于 DNA与染色剂结合。 的作用 溶液:保持口腔上皮细胞正常形态 0.9%NaCl 蒸馏水:配制染色剂,冲冼载玻片 三.方法步骤 操作步骤 注意问题 解释 载玻片要洁净,滴一滴质量分数为 防止污迹干扰观察效果 0.9%的 NaCl 溶液(生理盐水) 保持细胞原有形态 取口腔上皮 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁 消毒为防止感染, 漱口避免取材失败 细胞制片 上轻刮几下取细胞 杀死并固定装片;烘干时应来回移 将载玻片在酒精灯下烘干 动,防止受热不均破裂 将烘干的载玻片放入质量分数为 8% ①改变细胞膜的通透性, 加速染色剂 进入细胞 水解 的盐酸( HCl)溶液中,用 300C 水浴 ②促进染色体的 DNA与蛋白质分离而 保温 5min 被染色,细胞为死细胞 冲冼涂片 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片 10S 洗去残留在外的盐酸 缓水流:防止细胞被冲走 用吸水线除去多余的水分 染色 2 滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色 5min 吸取染色剂 除去多余的染色剂并盖上盖玻片 先低倍镜观察:选择染色均匀、色泽 观察 浅的区域,移至视野 使观察效果最佳 中央,调节清晰 后才换用高倍物镜观察: 现象 细胞核大部分被染成绿色 细胞核也有小部分被染成红色 细胞质大部分被染成红色 细胞质也有小部分被染成绿色 结论 DNA主要集中分布于细胞核中 在细胞质中也有 DNA分布 RNA主要集中分布于细胞质中 在细胞核中也有 RNA分布 第1页共21页 实验二: 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一 P18) 一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 二.实验原理: 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的 颜色反应 。 1. 还原糖 (如葡萄糖、果糖、麦芽糖 ) + 斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀 。 斐林试剂 甲液: 0.1g/ml NaOH 溶液 使用时:甲乙液等量混匀后立即使用 乙液: 0.05g/ml CuSO 4 溶液 实质: 是还原糖(全部单糖、麦芽糖、果糖、乳糖)与新制的 Cu ( OH) 2 反应生成砖红 色氧化亚铜( Cu2 O)。 2. 脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色) 。 3. 蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应 。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性 NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的 Cu2+作用,产生紫色反应。 ) 双缩脲试 A液: 0.1g/ml NaOH 溶液 使用时: 先加 A 液后加 B 液 液: 0.01g/ml CuSO 4 溶液 B 实质: 在碱性条件下, 肽键结构与铜离子 反生络合反应,生成紫色络合物。 淀粉遇碘变蓝色。三.实验材料 1.做 还原糖鉴定 实验:应选 含糖高,颜色为白色或近白色的 植物组织,如苹果、梨。( 因 为组织的颜色较浅,最好无色,防止颜色干扰且易于观察。 ) 2.做 脂肪的鉴定 实验:应选富 含脂肪的 种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡 3~4 小时(也可用蓖麻种子)。 3.做 蛋白质的鉴定 实验:可用 富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等 。 四、实验试剂 斐林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂、体积分数为 50%的酒精溶液,碘液、蒸 馏水。 五、方法步骤 (一)可还原糖的鉴定 操作方法 注意问题 解 释 苹果或梨 组织液 必须临时 制 1. 制备组织样液。 备。 因苹果多酚氧化酶含量高, 组织液很易被氧化成褐色, (去皮、切块、研磨、过滤) 要取 组织的颜色较浅,最好无 将产生的颜色掩盖。 色,易于观察。 2. 取 1 支试管,向试管内注 入 2mL组织样液。 应将组成斐林试剂的甲液、乙 3. 向试管内注入 1mL新制的 液分别配制、储存,使用前才 斐林试剂很不稳定,易分 斐林试剂,振荡(此时呈 将甲、乙液等量混匀成斐林试 解。 现斐林试剂的颜色: 浅蓝 剂; 色)。 切勿将甲液、乙液分别加入苹 试管放在盛有 50-65 0C 温 最好用试管夹夹住试管上部,水的大烧杯中, 加热约 2 分 使试管底部不触及烧杯底部, 钟 ,观察到溶液颜色:浅蓝 试管口不朝向实验者。 色 → 棕色 → 砖红色(沉 也可用酒 精灯对 试管直接 加 淀) 热。 留适当样液与反应后溶液做对照,结论:组织样液中含有还原糖  甲、乙液分别加入时可能无防止试管内的溶液冲出试管,造

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