副溶血性弧菌上课讲义.ppt

3?％氯化钠三糖铁琼脂中的反应为底层变黄不变黑，无气泡，斜面颜色不变或红色加深。 嗜盐性试验 挑取纯培养的单个可疑菌落，分别接种 0%、6%、8%和 10%不同氯化钠浓度的胰胨水，36 ℃±1 ℃培养 24 h，观察液体混浊情况。 副溶血性弧菌在无氯化钠和 10%氯化钠的胰胨水中不生长或微弱生长，在 6%氯化钠和 8%氯化钠的胰胨水中生长旺盛。 嗜盐性试验 6％NaCL 10％ NaCl MR?试验方法? MR试验方法：取一种细菌的24h培养物，接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，置37℃培养48～72h，取出后加甲基红试剂3～5滴，凡培养液呈红色者为阳性，以‘‘十”表示；橙色者为可疑，以“±”表示；黄色者为阴性，以“—”表示。 VP试验方法 VP试验方法?： 取一种细菌的24h纯培养物，接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，置37C培养48～72h取出后在培养液中先加VP试剂甲液0.6mL，再加乙液0.2mL，充分混匀。静置在试管架上，15min后培养液呈红色者为阳性，以“ ”表示；不变色为阴性，以“—”表示。1h后可出现假阳性。或者可以用等量的硫酸铜试剂于培养液中混合，静置，强阳性者约5min后就可产生粉红色反应。? MR:阳性（红色） 左侧为阴性对照 VP：阴性 五、抗原的特征 O抗原是耐热的菌体抗原，目前有O1~O13共13种，可用于血清学鉴定。 K抗原是一种荚膜抗原，现有K1~K71，也用于血清学鉴定。 中国大陆副溶血弧菌大部分是O3：K6。 六、检验实验 目前副溶血性弧菌的检验采用国标法（GB/T 4789.7—2013 ） 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a) 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃； b) 冰箱：2 ℃～5 ℃、7 ℃～10 ℃； c) 恒温水浴箱：36 ℃±1 ℃； d) 均质器或无菌乳钵； e) 天平：感量 0.1 g； f) 无菌试管：18 mm×180 mm、15 mm×100 mm； g) 无菌吸管：1 mL（具 0.01 mL 刻度）、10 mL（具 0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头； h) 无菌锥形瓶：容量 250 mL、500 mL、1000 mL； i) 无菌培养皿：直径 90 mm； j) 全自动微生物生化鉴定系统； k) 无菌手术剪、镊子。 培养基和试剂 3％氯化钠碱性蛋白胨水 、硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖（TCBS）琼脂、3％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂 、3％氯化钠三糖铁琼脂、嗜盐性试验培养基、3％氯化钠甘露醇试验培养基、3％氯化钠赖氨酸脱羧酶试验培养基、3％氯化钠 MR-VP 培养基、3％氯化钠溶液 、我妻氏血琼脂、 氧化酶试剂、 革兰氏染色液 、ONPG 试剂、Voges-Proskauer（V-P）试剂、 弧菌显色培养基、生化鉴定试剂盒。 目录 一、引起疾病症状（致病性、流行病学情况） 二、基本情况及特征 三、培养特性 四、生化特性 五、抗原特征 六、检验方法（举例阐述检验某一食品、商品中该菌的详细操作过程） 一.副溶血性弧菌疾病症状 副溶血性弧菌（Bibrio Parahemolyticus），进食含有该菌的食物致可食物中毒，也称嗜盐菌食物中毒。 副溶血弧性菌常导致肠胃不适，伴随食物中毒等症状。表现为急性肠胃炎，腹痛、吐泻、发烧等特征。少数重症者引起原发性败血症。 副溶血性弧菌的发现 于1950年10月从日本大阪市，发生的一起咸沙丁鱼食物中毒，患者肠道排泄物和食物中首次分离出副溶血性弧菌。 在日本，副溶血性弧菌食物中毒约占细菌性食物中毒的70%～80%.1958年上海市防疫站也从烤鸭所致食物中毒的患者中分离出此菌。以后在我国、日本、印度、美国等许多国家均陆续报道有本病的发生。 1966年国际弧菌命名委员会正式命名为副溶血性弧菌。 中毒食品主要是海产品鱼、虾、蟹、贝类和海藻等海产品，其次为咸菜、熟肉类、禽肉、禽蛋类，约有半数中毒者为食用了腌制品后。中毒原因主要是烹调时未烧熟煮透或熟制品被污染． 副溶血性弧菌致病性 致病因子： 1、耐热直接溶血素TDH，肠毒素 2、耐热相关溶血素TRH，与TDH 相似。 副溶血性弧菌的流行病学 1、传染源 传染源为病人，集体发病时往往仅少数病情严重者住院，而多数未住院者可能成为传染源，但由于病人仅在疾病初期排菌较多，其后排菌迅速减少，故不至因病人散布病菌而造成广泛流行。 2、传播途径 本病经食物传播，主要的