乙型肝炎病毒e抗原定量测定作业指导书.doc

乙型肝炎病毒e抗原定量测定作业指导书 目的：规范乙型肝炎病毒e抗原测定的标准操作程序，确保乙型肝炎病毒e抗原 测定的结果准确有效。 适用范围：在AutoLumo A2000化学发光检测仪上定量测定人血清中的乙型肝炎病毒 e抗原。 三、临床意义 乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg），一般通称e抗原。它来源于乙型肝炎病 毒的核心，是核心抗原的亚成分，或是核心抗原裂解后的产物，是可溶性蛋 白[1]。当核心抗原裂解时，可溶性蛋白部分（即e抗原）就溶于血清中，存 在于血液循环中。有研究表明，在PegIFNα2a治疗过程中，HBeAg水平对乙 肝治疗应答有较好的预测价值[2]。许多专家关注聚乙二醇干扰素治疗过程中 HBeAg或HBsAg浓度的动态变化，认为这种量的变化往往是抗原消失或血 清转换的前提，具有疗效预测作用。对于乙肝治疗过程中HBeAg和HBsAg 浓度明显下降的患者应鼓励继续治疗，以争取获得更好的疗效[3]。 方法原理 本产品采用双抗体夹心法原理进行检测。用抗-HBe制备磁微粒，辣根过 氧化物酶标记抗-HBe制备酶结合物。通过免疫反应形成抗体-抗原-酶标抗体 复合物，该复合物催化发光底物液发出光子，发光强度与HBeAg的含量成正 比。 五、标本的采集与处理 5.1.采用正确医用技术收集血清/血浆样本，推荐对于使用普通管采血的样 本，离心前样本应37℃孵育至少1h；对于使用促凝管采血的样本，离心 前样本应37℃孵育至少0.5h，离心条件10000g/min，10min；对于使用 抗凝管采血的样本，离心条件10000g/min，10min。抗凝管推荐使用肝 素钠作为抗凝剂，避免使用枸橼酸钠和EDTA抗凝剂。 5.2.样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响试验结果，应离心除去。 5.3.严重溶血、脂血或浑浊的样本不能用于测定。 5.4.样本收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样 本放置在2~8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应采用正确 离心条件提取血清或血浆冻存于-20℃以下，避免反复冻融。使用前恢复 到室温，轻轻摇动混匀。 六、标本拒收标准 1）严重溶血、脂血 2）标本标识不明 七、仪器与材料 7.1.仪器：适用于Lucy2、Lumo、AutoLumo A2000化学发光检测仪。 7.2.试剂：AutoLumo A2000专用乙型肝炎病毒e抗原试剂 7.2.1.试剂准备：本试剂为即用型试剂，可以直接放在仪器上。 7.2.2.试剂盒于2～8℃储存，有效期12个月。 7.2.3.试剂盒应防止冷冻，避免强光照射。 7.2.4.试剂盒开启使用后，2～8℃保存可使用1个月。 7.2.5.试剂盒可适应1周内常温运输，运输过程中应轻拿轻放，避免重压，防止雨雪淋湿和阳光曝晒。 7.2.6.试剂机载稳定性 7.2.6.1.试剂包（磁微粒混悬液、酶结合物）竖直向上存放， 在2~10°C环境下冷藏保存2小时后，才可上机使 用。首次使用后，机载或在2 ~10°C 环境下稳定期 为28天。 7.2.6.2.要进行分装，于-20℃冻存，但应避免反复冻融。 八、检验方法 8.1.消耗品检查： 8.1.1.根据仪器说明装载或检查消耗品是否充足。 8.1.2.参考相应的仪器系统操作说明。 8.2.试剂包装载： 8.2.1.试剂包首次上机前，轻轻地倒转试剂包多次以混合新试剂包内的成 分，避免产生气泡。不要倒转已经打开的试剂包。 8.2.2.仪器通过扫描试剂包条码自动获取测试所需的参数。 8.2.3.如果特殊情况下仪器无法识别条码，可以手工输入。 8.2.4.参考相应的仪器系统操作说明。 8.3.测试： 8.3.1.将样本容器放置在仪器配套样本架中，每次测试样本量为50μl。 8.3.2. 装载样本架，在仪器软件界面中输入样本信息。 8.3.3.选择“运行”开始测试