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固相萃取（SPE）技术基础与应用 Accuracy Begins Here We are new! 2010年，Agilent与Varian正式合并 1979年，Varian 研发出第一支直管型商品SPE小柱Bond Elut，铸 就超过30年的行业标准 今天我们拥有固相萃取、固相支持液液萃取、过滤三大产品线， 超过2000个订货号，成为全球第一大样品前处理产品供应商 我们将为食品安全，环境检测，制药及临床药物分析，法医，工 业产业等各行各业提供安捷伦最全面的样品制备解决方案 强强联手 - 安捷伦样品前处理全系列产品 提高样品的质量，从而改善分析的质量 固相萃取产品 固相支持液液 萃取产品 过滤产品 内容提要 ? 萃取与固相萃取概述 固相萃取构型与吸附剂 ? 如何理解固相萃取 ? 色谱分离 ? 固相萃取模式解析 ? 多残留分析\基质效应\plexa ? 问题与讨论 为什么要做样品预处理－如您所知 样品收集 样品分析 X 原形样品不适合直接进行进一步分析!!!… 为什么? 浓度太低——被测物浓度低于定量限 样品太“脏”——基质组分的存在影响样品测定 太“危险”——污染物可能成为“色谱柱杀手” 萃取与固相萃取概述 SPE柱构造 LRC柱管 标准柱管 "Shrink-wrapped" 针头式（Jr） polypropylene 吸附柱床 Luer 头 干净的聚乙烯筛板 6 萃取与固相萃取概述 ? SPE是一种吸附剂萃取，样品通过填充吸附剂的一次性萃取柱，分析物和 杂质被保留在柱上，然后分别用选择性溶剂去除杂质，洗脱出分析物，从 而达到分离的目的。 ? SPE的分离模式主要取决于 ? 吸附剂 目标物 ? 溶剂的性质 ? 基质的性质 ? 目标物 吸附剂 基质 7 萃取与固相萃取概述 容量与洗脱体积 50mg 100mg 200mg 500mg 1000mg 5g 10g < 2.5mg 125uL < 5mg 250uL < 10mg 500uL < 25mg 1mL < 50mg 容量 2mL 吸附剂重量的5% < 0.25g 10mL 洗脱体积 < 0.5g 20mL 2倍于吸附剂容量 8 萃取与固相萃取概述 传统液液萃取方法 ? 加入不相溶萃取溶液 物质在两相之间的分配 ? 两相振摇与分层 增加表面积加速热力学平衡 ? 收集萃取溶液 ? 希望不要有乳化现象！ 所谓萃取法 ,就是从样品中提取组分 ,传统的 方法是液液萃取法 ( LLE) ,即用液体作为提 取剂 ; 9 萃取与固相萃取概述 固相萃取方法 大的比表面积 振摇 固相萃取 液液萃取 固相萃取法 ,是用固体物质作为萃取剂 ,采用高效、高选择性的固定相进行萃取的样品 预处理技术。 SPE技术自上世纪70年代后期问世以来，发展迅速，广泛应用于环境、制药、 临床医学、食品等领域 SPE法的优点 ?样品处理简单、快速，简化样品前处理操作步骤，大大缩短前处理时间。 ?处理过的样品易于贮藏、运输 ,便于实验室间进行质控。 ?可选择不同类型的吸附剂和有机溶剂用以处理各种不同类的有机污染物。 ?避免乳化现象 ,提高了分离效率。 ?大大节约有机溶剂 ,降低了成本和对环境的污染 ?易于与其他仪器联用 ,实现自动化在线分析。 萃取与固相萃取概述 微观基础：分子之间的作用力 ? 作用力类型 作用力能量（(kcal /mol)） ? 偶极相互作用 5–10 ? 诱导偶极 2–7 ? 范德华力 1–5 ? 电荷作用力 50–200 ? 氢键作用力 5–10 ? 作用模式：离子交换，反相，正相 萃取与固相萃取概述 充分利用分子间的作用力——硅胶基质固定相的分类 非极性固定相 极性固定相 C18 十八烷基 CN 腈丙基 C2 乙基 2OH 二羟基 CH 环己基 NH2 氨丙基 PH 苯基 SI 硅胶 离子交换固定相 专用固定相 PBA SCX 强阳离子交换 CERTIFY CBA 弱阳离子交换 ENVIRELUT SAX 强阴离子交换 ACCUCAT NH2 弱阴离子交换 13 萃取与固相萃取概述 SPE柱填料类型 硅胶基质的吸附剂 在SPE法中最常用的吸附剂是硅胶或键合的硅胶，即在硅胶表面的硅醇基团上键合不同 的有机基团，如烷基链或其它官能团，如-OH、-C6H5、-NH2、-CN等。 聚合物基质的吸附剂 有机聚合物或改性的有机聚合物，例如苯乙烯二乙烯基苯聚合物等 非硅胶吸附剂 Al2O3,Floril,石墨化碳GCB B萃取与固相萃取概述－Bond Elut Non-polar Polar PSA - primary and C18, C8, C2, C1 C18 variations in carbon load and endcapping EnvirElut secondary am