多型性腮腺肿瘤p53和Ki.docx

多型性腮腺肿瘤p53和Ki-67的免疫组化表达 郭树江 河南煤化集团鹤壁煤业公司总医院五官科 458000 【摘要】目的： 探讨Ki-67、P53的表达与多型性腮腺瘤的发生及其临床病理 意义。方法：2004年1月至2009年10月所用之石蜡包埋组织标本的腮腺多 型性腺瘤患者，经随访3年以上，其中良性30例，恶性26例；以正常腮腺组 织30例为对照。应用Envision法检测应用免疫组Ki-67、P53的表达，分析其 与腮腺多型性腺瘤良恶性之间的关系。结果： ①p53在正常腮腺组织中的表 达:腺管细胞P53强阳性1例（3.3%）,中等3例（10.0%）,弱阳性12例（40.0%）， 无表达14例（46.7%））腺泡细胞染色阴性25例（83.3%），3例弱阳性（10.0%）， 2例中等（6.7%）。间质细胞p53强阳性1例（3.3%），弱阳性8例（26.7%）， 21例阴性（70.0%）。②Ki-67在正常腮腺组织中的表达 ：腺管细胞Ki-67强 阳性0例（0.0%），中等2例（6.7%），弱阳性6例（20.0%），无表达22例（73.3%）； 腺泡细胞染色阴性27例（90.0%）,弱阳性3例（10.0%）；间质细胞染色强阳 性0例（0.0%），弱阳性5例（16.7%），无表达25例（83.3%）。③p53在PA 表达 p53表达强阳性7例（23.3%），中度染色16例（53.3%），弱阳性7例 （24.4%） 0多形性腺瘤粘液软骨样组织中 P53表达强阳性1例（3.3%），中度 染色11例（36.7%），弱阳性18例（60.0%） o P53在粘液软骨样组织中表达和 肿瘤导管细胞p53表达差异有统计学意义（PV0.001 ）。④Ki-67在PA表达 Ki-67表达强阳性5例（16.7% ），中度染色12例（40.0% ），弱阳性13例 （43.3% ）;多形性腺瘤粘液软骨样组织中 Ki-67表达强阳性2例（6.7% ），中 度染色7例（23.3% ），弱阳性21例（70.0% ）。Ki-67在粘液软骨样组织中表 达与肿瘤导管细胞之间比较差异有统计学意义（P0.01 ）o⑤2.5 p53在CAP 表达p53表达强阳性11例（42.3% ），中度染色5例（19.2% ），阴性10例 (38.5% )。⑥2.6 Ki-67在CAP表达 Ki-67表达强阳性13例(50.0% ),中度 染色3例(11.5% ),阴性10例(38.5% )。结论：Ki-67、P53在腮腺肿瘤呈 高表达，二者联合检测可提高诊断准确度。 【关键词】 腮腺；上皮性肿瘤； 免疫组化检查； 肿瘤抑制基因；Ki-67 多型性腮腺瘤(Pleomorphic salivary ade no ma，PA )是最常见的腮腺肿瘤 ⑴， 部分可呈恶化并发生远处转移 ⑵。腮腺癌在多形性腺瘤中(Carci noma ex pleomor phicadenomq CPA)是存在于多型腮腺瘤中恶性转化所致［3］，是最常见 的恶性混合瘤，约占全部腮腺肿瘤的 10%⑷。由多型腮腺瘤转化为腮腺癌的确 切病理学机制仍然不清，可能涉及不同分子学事件 ［5］。癌症的分子生物学研究 表明，肿瘤抑制基因如p53功能的缺失可能导致各种癌症的发生［6,7］。P53肿瘤 抑制基因的突变是人类肿瘤最常见的遗传变异。肿瘤细胞增生程度是反映其生 物学行为的重要参数，直接影响着临床治疗和预后， Ki-67是一种敏感而特异 的增殖期细胞标记物⑹。本研究的目的在于探讨 Ki-67、P53的表达与多型性腮 腺瘤的发生及其临床病理意义。 1资料和方法 一般资料 福尔马林固定、石腊包埋组织标本，多型性腮腺瘤30 例, CPA26 例，男性32例，女性24例，年龄25?84 (48.3 ±3.5)岁；同期切除的正常腮 腺组织30例(男16例，女14例，年龄21?77岁)为对照组。所有标本均经 HE染色，并为病理学医生再次确认。 1.2试剂Ki-67单克隆抗体，克隆号：SP12; p53单克隆抗体，克隆号：DO-11。 显色剂：DAB-0031，福州迈新生物技术开发公司；En visio nTM+加强型试剂盒， 丹麦Dako公司，编号：K400033。 1.3方法 石蜡标本4卩m厚连续切片，免疫组化采用 SP法，石蜡切片置 0.01mmol/L柠檬酸缓冲液微波修复抗原，DAB显色，苏木素复染，脱水、透 明、封片。已知阳性片作阳性对照，PBS替代一抗作阴性对照。 1.4结果判断Ki-67和p53均定位于细胞核，以背景清晰细胞核出现明显棕黄 色颗粒为阳性反应。 计数采用Ki-67指数和p53指数:6,8:，指每个标本低倍镜 （X 100）下观察并确定有代表性的 Ki-67和p53染色阳性视野，选择5个视野， 在高倍镜（X 40