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水杨酸钠 半衰期的测定 医学 院 药 理 学 系 【实验目的】 ? 学习使用比色法测定水杨酸钠半衰期 取空白 样本 采不同时间点 含药体液样本 给药 分析测定 生物样品处理 绘制 CT 曲线 计算拟合参数 【实验步骤】 -1 ? 1 、取试管 5 支，分别标 1-5 号，用 5ml 移液管 加入 10% 三氯醋酸 5ml ? 2 、取家兔一只 → 称重 → 乌拉坦（ 5ml/kg ）腹腔注射 麻醉 → 固定 → 颈总动脉插管 → 耳缘静脉注入 0.5% 肝素 1ml/kg→ 松开动脉夹放血于空白试管 → 移液器 精密量 取 1ml 于 1 号试管、搅拌 ? 3 、耳缘静脉注入 5% 水杨酸钠 5ml/kg ，计时 → 注射后 5 ， 30 时松开动脉夹放血于空白试管 → 移液器 精密量 取 1ml ，分别加入 2 、 3 号试管，分别用洁净玻棒搅拌 【实验步骤】 -2 ? 4 、 4 号和 5 号试管先后用 1ml 移液管 加入蒸馏水和 0.05% 水杨酸钠各 1ml 。 ? 5 、取 1 、 2 、 3 试管进行离心（ 3000 转× 5 ） → （用 5ml 注射器＋长针头 ）准确吸取上清液 3ml 转移至 相同编号的另一套试管中 → 用 移液器 精密加入 10% 三氯化铁 0.3ml→ 摇匀 ? 6 、 722 型分光光度计于 510mu 波长比色：以 4 号管 调“零”读出 5 号管光密度（ A ）（记为 X ） → 再以 1 号管调零 , 读出 2,3 管的光密度（ A ）（记为 X1 和 X2 ） Protocal 1 2 3 4 5 10% 三氯醋酸 5ml 0 5 30 蒸 馏 水 0.05% 水杨酸钠 充分混匀后离心（ 3000 转× 5 ） 无 处 理 取 3ml 上 清 移至另一套 试 管 并 加入 10% 三氯化铁 0.3ml ，摇匀 于 510mu 波长比色： 以 4 号管调“零”读出 5 号管光密度（ A ）（记为 X ） 以 1 号管调零 , 读出 2,3 管的光密度（ A ）（记为 X1 和 X2 ） 5ml 移液管 1ml 枪 5ml 注射器 【注意事项】 ? 整个操作过程中应注意枪头、移液管、试管之间不 能相互污染 ? 放血操作时，一开始放出的血舍去不用 ? 离心时必须将套管＋离心管配平 ? 分光光度计分析时需将比色皿的光面用擦镜纸擦净 擦干 【数据处理】 （ 1 ）求算水杨酸浓度（ Y ）分光密度（ X ）的比例常数。 K ＝ Y/X （ 2 ）求算水杨酸钠血浓度 给药后 5 分钟血浓度 Y1=KX1 给药后 30 分钟血浓度 Y2=KX2 （ 3 ）根据公式求半衰期 t1/2 t1/2 ＝ 0.301 ×（ t2-t1 ）×（ logY2-Y1 ）