T细胞体外扩增培养.docxVIP

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2020-06-16 发布于天津
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欢迎下载精品文档人细胞分离与体外培养实验方案一实验目的从人外周血中分离利用和免疫磁珠分离并扩增细胞用于慢病毒载体的感染二实验过程人外周血单个核细胞的分离每外周血大约可获得个单个核细胞采血稀释外周血稀释液在离心管中加入人淋巴细胞分离液沿倾斜的管壁缓缓加入稀释的外周血稀释血离心离心后轻轻吸取中间白膜层移入另一试管中加入足量的稀释液充分洗涤离心弃上清细胞沉淀加培养液重悬即可用于细胞的磁珠分选细胞分选适量的缓冲液洗涤离心去上清缓冲液重悬此加入免疫磁珠此混匀孵育冲液洗涤细胞次离心弃去上清缓冲液重悬细胞将分

PAGE PAGE # 欢迎下载精品文档人 T 细胞分离与体外培养实验方案一．实验目的从人外周血中分离PBMCs利用CD3和CD3/CD2免疫磁珠分离并扩增T细胞，用于慢病毒载体的感染。二．实验过程人外周血单个核细胞的分离 (每mL外周血大约可获得1 X106个单个核细胞) ⑴ 采血，稀释(外周血：稀释液 =1：1)； ⑵ 在离心管中加入人淋巴细胞分离液，沿倾斜的管壁缓缓加入稀释的外周血( Ficoll ：稀释血 =1：2)； ⑶ 20C, 440g，离心 20-30min ; ⑷ 离心后轻轻吸取中间白膜层，移入另一试管中； ⑸加入足量的稀释液充分洗涤，400g,

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