脲酶Km值测定教学提纲.pptVIP

实验三 脲酶的Km值简易测定;1926年，美国生化学家Sumner从刀豆中得到脲酶结晶，并证明了脲酶的本质是蛋白质。1946年获得诺贝尔化学奖。;酶;酶的特征常数;实 验 目 的;一 、原理;米—曼氏方程（Michaelis-Menten equation）; Km值：当酶反应速率达到最大反应速率一半时的底物浓度，单位是mol／L。 Km值最小的底物称为该酶的最适底物也就是天然底物。 ; 底物浓度对酶促反应速度的影响;Km值与 Vmax值测定;酶促反应的原料;操作中每种试剂务必摇匀 煮沸脲液时注意试管口不能对人，变性脲酶液要煮沸变性彻底 试管一定要清洗干净，防止其他残留液体对实验的影响 各组试管加样注意一致性，防止人为加样造成的误差。重复测值，取平均数值 ;实验操作;100g/L ZnSO4;迅速摇匀，用721型分光光度计，420nm，以对照调零，测定各管A值。 ;讨论小结;思考题：