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共聚焦显微镜下的荧光观察  荧光的基本知识 荧光 ·荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后,即刻引起发光;停止能量供给, 发光亦瞬间停止。荧光蛋白是一种可吸收激发光的光便能产生荧光的蛋白。 ·发射光谱指固定激发波长,在不同波长下所记录到的样品发射荧光的相对强度。 激发光谱指国定检测发射波长,用不同波长的激发光激发样品所记录到的相应的 荧光发射强度。  共聚焦显微镜应用技术 1、免疫荧光技术 ·用荧光标记的抗体或抗原与样品中相应的抗原或抗体结合,以适当检测 荧光的技术对其进行分析的方法。 由于荧光素所发出的荧光可在共聚焦显微镜下检出,从而可对抗原进行 细胞定位。  AlexFluor598-IRF3 merge  ·2、自发荧光的生物大分子 绿色荧光蛋白 绿色荧光蛋白(GFP),其基因产生的蛋白质,在蓝色波长范围的 光线激发下,会发出绿色荧光 应用:利用绿色荧光的发光机制,可将GFP作为蛋白质标签,即利用 DNA重组技术,将目的基因与GFP基因构成融合基因,转染合适的细胞 进行表达,然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋白进行细胞内活体观察