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共聚焦显微镜应用
—细胞原位检测核酸
目录
概述
·P的特性
P的应用
·P标记细胞的方法
概述
激光扫描共聚焦显微术通过成像显示出细胞内核酸的分布特征
及含量,即实现定位、定性及定量检测核酸。该方法常用于细胞核
定位及其形态学观察、检测细胞内DNA的复制及断裂情况以及染色
定位观察等。
荧光探针分子与核酸结合方式
①嵌入性结合方式
嵌入在DNA的两个碱基之间,每隔几个碱基嵌入一个荧光分子
·②结构亲和方式
以静电力结合,正电荷荧光分子和带负电和的磷酸互相结合,极弱,常造成
荧光分子丢失
·③共价键方式
使DNA链之间以原子结合的方式被打开,形成与荧光探针分子共价结合
碘化丙啶(PI)检测核酸
P的特性
P属于嵌入性荧光探针,可以嵌入到双
链DNA和RNA碱基对中与之结合,无
碱基特异性。这种结合方式紧密,稳
通常,P色可以同时标记双链DNA
和RNA的总和;经过RNA萌处理除去
P另一特点是不能进入完整的细胞膜
因此用于检测细胞的死活
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