11DNA重组技术的基本工具陕西省柞水中学索文斌.ppt

1.1 DNA 重组技术的基本工具 陕西省柞水中学生物组：索文斌 教材分析 ? 高中生物选修 3 第一章《基因工 程》，是选修 3 整本书的重点，它是 其它几个章节的基础。 本节是 专题一《基因工程》的第一节，内 容较抽象，不易理解，但这节的学 习是下一节《基因工程的基本操作 程序》的基础，在整体上起到举足 轻重的作用，是本章的重点内容。 重点 难点 ? 教学重点： DNA 重组技术所需要 3 种基本工具 的作用 ? 教学难点 基因工程载体需要具备的条件 目标分析 知识目标： 简述 DNA 重组技术所需三种基本工具的 作用 能力目标： 培养学生自己动手制作模型的能力 情感目标： 认同基因工程的诞生和发展离不开理 论研究和技术创新 ? 教法、学法分析 ： 教法 ： 本节课结合多媒体教学，启发式，分组讨论 式等教学方法，由此体现教师的引导作用。 学法 ： 在整个教学过程中，重要的是让学生充分体 现其主体性。 让学生读 —— 通过阅读课文，培养学生收集信息 的能力。 让学生讲 —— 讨论分析信息，培养学生语言组织 和表达能力。 让学生想 —— 思考问题，培养学生归纳、比较等 综合能力。 生长快、肉质好的转基因 鱼 ( 中国 ) 乳汁中含有人生长激素的 转基因牛 ( 阿根廷 ) 过程分析 基因工程的概念： 基因工程的别名 基因拼接技术或 DNA 重组技术 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 回顾： 资料分析： 位于费城托马斯 · 杰斐逊大学的希拉 里和她的同事成功地将人体狂犬病抗体 的 DNA 译码移入烟草作物中。 转基因烟草作物可以产生一种人体 蛋白质，而这种物质能抗击致命性的狂 犬病病毒。 导入： ? 此转基因实验实现了哪种生物的哪 些性状在另外哪种生物中表达？ ? 性状的表达与我们从前学过的什么 过程有关？ ? 要实现药物基因在烟草中的表达， 要提前做哪些关键工作 ? 学习目标 1 简述 DNA 重组技术所需三种基本工 具的作用 2 培养学生自己动手制作模型的能力 3 认同基因工程的诞生和发展离不开理 论研究和技术创新 DNA 重组技术的基本工具 ? 准确切割 DNA 的工具（“分子手术刀”） —— 限制性核酸内切酶 ? DNA 片段的连接工具（“分子缝合针”） —— DNA 连接酶 ? 基因转移工具（“分子运输车”） —— 基因进入受体细胞的载体 思考 分组讨论 ? 原核生物为什么没有在长期的进 化过程中由于外源 DNA 的入侵而 灭绝，有什么保护机制？ 限制性内切酶从哪里寻找？ 1. 限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶的作用特点： 1. 能识别特定核苷酸序列； 2. 从特定部位的两个核苷酸之间切开。 限制性内切酶 限制 酶 黏性末端和平末端 限制酶所识别的序列有什么特点 ? 限制酶所识别的序列，无论是 6 个碱 基还是 4 个碱基，都可以找到一条中 心轴线，中轴线两侧的双链 DNA 上的 碱基是 反向对称重复排列 的。 分组讨论： 以下是两种限制酶切割后形成的 DNA 片段，试分析： ① GC … ② AATTC … ③ … GC ④ … CTTAA CG … G … … CG … G (1) 其中①和 是由一种限制酶切割形成的 末端，两者要重组成一个 DNA 分子，所用 DNA 连接 酶通常是 。 （ 2 ） 和 是由另一种限制酶切割形成的 末端，两者要形成重组 DNA 片段，所用的连接酶通常 是 。 反馈练习： 2 . 基因的针线── DNA 连接酶 切断的 DNA 片段要与受体细胞的 DNA 连接，你觉得可以用什么酶？ DNA 聚合酶和 DNA 连接酶有何 相同和不同点？ 阅读思考： DNA 连接酶 DNA 聚合酶 连接 DNA 链 双链 单链 连接部位 在两 DNA 片段之 间形成 磷酸二酯 键 将单个核苷酸 加到已存在的 核酸片段的 3 ' 末端的羟基上， 形成 磷酸二酯 键 阅读 总结 限制酶切割后有两种不同的结果， 一种产生黏性末端，一种产生平末端。那 么恢复它们的连接时，也有两种酶。 黏性末端 平末端 3. 基因进入受体细胞的载体 常用的运载体： 质粒、 噬菌体和动、 植物病毒等 载体必须具备的条件 ? 如果载体对受体细胞有害将怎样？ ? 目的基因是否进入受体细胞，没有标记 基因我们能否鉴定？ ? 假如目的基因导入受体细胞后不能复制 将怎样？ ? 作为载体没有切割位点将怎样？