71 氨基酸类药物的制备.ppt

7.1 氨基酸类药物的制备 7.2 多肽与蛋白质类药物的制备 7.3 核酸类药物的制备 7.4 酶类药物的制备 7.5 糖类药物的制备 7.6 脂类药物的制备 第二篇 重要生物药物制备工艺 7.1 氨基酸类药物的制备 一、氨基酸及其衍生物在医药中的应用 氨基酸是构成蛋白质的基本组成单位，蛋白质的 生物功能与构成蛋白质的氨基酸种类、数量、排列顺 序及由其形成的空间构象有密切的关系。 氨基酸通过体内转化而维持其动态平衡，若其动 态平衡失调，则机体代谢紊乱，甚至引起病变。 必需 氨基酸：人及哺乳动物自身不能合成，需由食物供应。 氨基酸具有丰富的营养价值，能治疗多种疾病， 氨基酸及其衍生物能够治疗消化道疾病、肝病、脑及 神经系统疾病、肿瘤和其它与氨基酸相关联的疾病。 二、氨基酸类药物的生产方法 1 、 目前全世界天然氨基酸的年总产量在 百万吨 左 右，其中产量较大者有 谷氨酸、蛋氨酸 及 赖氨酸 ，其 次为 天门冬氨酸、苯丙氨酸 及 胱氨酸 等。它们主要用 于 医药、食品、饲料及化工 行业中。 2 、 氨基酸的生产方法有天然 蛋白质水解法、发酵 法、酶转化法 及 化学合成法 等四种。 3 、 氨基酸及其衍生物类药物已有百种之多，但主 要是以 20 种氨基酸为原料经 酯化、酰化、取代 及 成盐 等化学方法或酶转化法生产。 （一）水解法 1 、基本原理与过程 以毛发、血粉及废蚕丝等蛋白质为原料，通过 酸、 碱或酶水解成 多种氨基酸混合物，经分离纯化获得 各种药用氨基酸的方法称为水解法。 目前用水解法生产的氨基酸有 L- 胱氨酸、 L- 精氨 酸、 L- 亮氨酸、 L- 异亮氨酸、 L- 组氨酸、 L- 脯氨酸 及 L- 丝氨酸 等。 水解法生产氨基酸的主要过程为 水解、分离 和 结 晶 精制三个步骤。 （ 1 ）蛋白质水解方法 目前蛋白质水解分为 酸水解法、碱水解法 及 酶水 解法 三种。 ①酸水解法 ：蛋白质原料用 6 ～ 10mol ／ L 盐酸或 8mol ／ L 硫酸于 110 ～ 120 ℃（回流煮沸）水解 12 ～ 24h ，除酸后即得多种氨基酸混合物。此法 优点 是水 解迅速而彻底，产物全部为 L- 型氨基酸 ，无消旋作 用。 缺点 是 色氨酸 全部被破坏， 丝氨酸 及 酪氨酸 部 分被破坏，且产生大量废酸污染环境。工业上较普 遍采用。 ②碱水解法 ：蛋白质原料经 6mol ／ L 氢氧化钠或 4mol ／ L 氢氧化钡于 100 ℃水解 6h 即得多种氨基酸混 合物 。该法 水解迅速而彻底 ，且 色氨酸不被破坏 ，但 含羟基 或 巯基 的氨基酸全部被破坏，且 产 生消旋作 用 。工业上多不采用。 ③酶水解法 ：蛋白质原料在一定 pH 和温度条件下 经 蛋白水解酶 作用分解成 氨基酸 和 小肽 的过程称为 酶水解法。 此法 优点 为反应条件温和，无需特殊设备，氨基 酸不破坏，无消旋作用。 缺点 是水解不彻底，产物 中除氨基酸外，尚含较多肽类。工业上 很少用 该法 生产氨基酸而主要用于生产水解蛋白及蛋白胨。 （ 2 ）氨基酸分离方法 氨基酸分离方法较多，通常有溶解度法、等电点 沉淀法、特殊试剂沉淀法、吸附法及离子交换法等。 ①溶解度法 ：是依据不同氨基酸在水中或其它溶剂 中的 溶解度差异 而进行分离的方法。 胱氨酸 和 酪氨酸 均 难溶于水 ，但在 热水 中 酪氨酸 溶解度 较 大，而 胱氨酸 溶解度变化 不大 ，故可将混合 物中胱氨酸、酪氨酸及其它氨基酸彼此分开。 ②特殊试剂沉淀法： 系采用某些有机或无机试剂与 相应氨基酸形成 不溶性衍生物 的分离方法。 ③吸附法： 是利用吸附剂对 不同氨基酸吸附力的差 异 进行分离的方法。如 颗粒活性炭 对苯丙氨酸、酪 氨酸及色氨酸的吸附力大于对其它 非芳香族 氨基酸 的吸附力，故可从氨基酸混合液中将上述氨基酸分 离出来。 ④离子交换法： 是利用 离子交换剂对不同氨基酸吸 附能力的差异 进行分离的方法。氨基酸为 两性电解 质 ，在特定条件下，不同氨基酸的带电性质及解离 状态不同，故同一种离子交换剂对不同氨基酸的吸 附力不同。 （ 3 ）氨基酸的精制方法 分离出的特定氨基酸中常含有少量其它杂质，需进行 精制，常用的有 结晶和重结晶技术 ，也可采用 溶解度法 或 结晶与溶解度法相结合 的技术。 丙氨酸在稀乙醇或甲醇中溶解度较小，且 pI 为 6.0 ，故 丙氨酸可在 pH6.0 时，用 50 ％冷乙醇结晶或重结晶加以精 制。 溶解度与结晶技术相结合 的方法精制氨基酸。如在沸 水中 苯丙氨酸 溶解度 大于酪氨酸 100 倍，若将含少量酪氨 酸的苯丙氨酸粗品溶于 15 倍体积（ w ／ v ）的热水中，调 pH4.0 左右，经脱色过滤可除去大部分酪氨酸；滤液浓缩 至原体积