生物化学经典实验DNA琼脂糖凝胶电泳原理步骤试剂配制结果分析.pptVIP

下载本文档

237
0
约小于1千字
约 25页
2020-07-09 发布于福建
举报
版权申诉

生物化学经典实验DNA琼脂糖凝胶电泳原理步骤试剂配制结果分析.ppt

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

DNA琼脂糖凝胶电泳实验原理琼脂糖为链状多糖→绳状琼脂糖束→大网孔型凝胶—分离、鉴定、纯化DNA 在pH值为80~83时,核酸分子碱基几乎不解离,磷酸全部解离,核酸分子带负电,在电泳时向正极移动采用适当浓度的凝胶介质作为电泳支持物,在分子筛的作用下,使分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大的差异,从而达到分离核酸片段检测其大小的目的实验原理心当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶( Ethidium bromide,EB)染色,在紫外光下至少可以检出1- 10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA 条带,用于以后的克隆操作。心该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段影响DNA迁移率的因素影响DNA迁移率的因素:DNA分子的大小、构象,凝胶浓度,电压,电泳缓冲液的组成等缓冲液pHDNAp,DNA带负电荷,迁移率与分子量对数成反比之DNA分子构象影响迁移率:共价闭环DNA线状DNA开环DNA 心DNA片段越长,泳动速度越慢心在低电压时,泳动速度与电场强度成正比不同浓度琼脂糖分离DNA分子的范围琼脂糖浓度(W八V,%)。分离范围(kb) 5-60 1-20 0.7 0.8-10 0.5-7 0.4-6 0.2-4 0.1-3 DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系