pET-28b(+)大肠杆菌表达载体说明.pdfVIP

pET-28b(+) 编号 载体名称 北京华越洋生物VECT4410 pET-28b(+) pET28b 载体基本信息 别名: pET28b, pet 28b, pET-28(+) 质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达 表达水平: 高 克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶 载体大小: 5368 bp 5 测序引物: T7 5 测序引物序列: 5-TAATACGACTCACTATAGGG-3 载体标签: N-His, N-Thrombin, N-T7, C-His 载体抗性: Kanamycin 备注: 载体带有N 端凝血酶蛋白酶切位点; pET28a, b, c 的差异主要 是在多克隆位点; 稳定性: 瞬时表达 组成型: 组成型 病毒/非病毒: 非病毒 pET28b 载体质粒图谱和多克隆位点信息 pET28b 载体简介 pET-28b 载体带有一个N 端的His/Thrombin/T7 蛋白标签，同时含有一个可以选择的C 端 His 标签。pET28b 载体的单一的 多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意：载体序 列是以pBR322 质粒的编码规矩进行编码的，所以T7 蛋白表达区在质粒图谱上面是反向 的。 T7 RNA 聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1 复制子 是被定向的，所以在 T7 噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够 产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7 终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终 止蛋白翻译。 The pET-28a-c(+) vectors carry an N-terminal His•Tag®/ thrombin/ T7•Tag® configuration plus an optional C-terminal His•Tag sequence. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circular map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymeraseis shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single stranded sequencing should be performed using the T7 terminator primer (Cat. No. 69337-3). pET28b 载体序列 ORIGIN 1 ATCCGGATAT AGTTCCTCCT TTCAGCAAAA AACCCCTCAA GACCCGTTTA GAGGCCCCAA 61 GGGGTTATGC TAGTTATTG