生物反应工程复习资料.docx

生物反应工程原理复习资料 编辑 陈豪 张会 刘应刚 生物反应工程原理复习资料 生物反应过程与化学反应过程的本质区别在于有生物催化剂参与反应。 生物反应工程 是指将实验室的成果经放大而成为可提供工业化生产的工艺工程。 酶和酶的反应特征 酶是一种生物催化剂，具有蛋白质的一切属性；具有催化剂的所有特征；具有其特有的催化特征。 酶的来源 ：动物、植物和微生物 酶的分类： 氧化还原酶、水解酶、裂合酶、转移酶、连接酶和异构酶 酶的性质 ：1）催化共性：①降低反应的活化能②加快反应速率③不能改变反应的平衡常数。 2)催化特性：①较高的催化效率 ②很强的专一性 ③温和的反应条件 易变性和失活 3）调节功能：浓度、激素、共价修饰、抑制剂、反馈调节等 固定化酶的性质 固定化酶 ：在一定空间呈封闭状态的酶，能够进行连续反应，反应后可以回收利用。 与游离酶的区别： 游离酶 ----一般一次性使用（近来借助于膜分离技术可实现反复使用） 固定化酶 --能长期、连续使用（底物产物的扩散过程对反应速率有一定的影响；一般情况下稳定性有所提高；以 离子键、物理吸附、疏水结合等法固定的酶在活性降低后，可添加新鲜酶溶液，使有活性的酶再次固定， “再生 ” 活性） 固定化对酶性质的影响： 底物专一性的改变 、稳定性增强 、最适 pH 值和最适温度变化、动力学参数的变化 单底物均相酶反应动力学 米氏方程 k k E S ES E P k 快速平衡法假设： （1）CS>>CE ，中间复合物 ES 的形成不会降低 CS（2）不考虑 ES E P 这个可逆反应（ 3） 为快速平衡， 为整个反应的限速阶段，因此 ES 分解成产物不足以 E S ES ES E P 破坏这个平衡 稳态法假设： （1）CS>>CE，中间复合物 ES 的形成不会降低 CS（2）不考虑 这个可逆 ES E P 反应（ 3）中间复合物 ES 一经分解，产生的游离酶立即与底物结合，使中间复合物 ES 浓度保持衡定，即 dC ES 0 dt 1 生物反应工程原理复习资料 编辑 陈豪 张会 刘应刚 双倒数法（ Linewear Burk ）： 对米氏方程两侧取倒数 1 1 得 1 1 K 1 以 作图 ~ m r C r r r C S max max S K 1 m 得一直线，直线斜率为 ，截距为 r r max max 根据直线斜率和截距可计算出 Km 和 rmax 抑制剂对酶反应的影响： 失活作用（不可逆抑制） 抑制作用（可逆抑制 ）：竞争抑制 、反竞争抑制 、非竞争抑制 、 混合型抑制 竞争抑制反应机理： k k 1 2 E S ES E P k 1 K I E I EI 非竞争抑制反应机理： k k 1 2 E S ES E P k 1 K I E I EI K I ES I ESI 2 生物反应工程原理复习资料 编辑 陈豪 张会 刘应刚 可逆抑制各自的特点： P37 多底物均相酶反应动力学 (这里讨论：双底物双产物情况 ) A B P Q 强制有序机制 顺序机制 西-钱氏机制 双底物双产物反应机制： 随即有序机制 乒乓机制 注意 在工业级反应中， 反应速度一般是由改变所用 酶浓度 和（或） 反应时间 ，而不是改变底物浓度来控制的，并且 要测定的最重要参数是可测的转化率，而不是反应速度 酶失活的因素有哪些？ 酶会由于种种因素发生失活。其中热失活最重要。酶的热失活随温度升高而失活程度加剧。 物理因素有： 加热、 冷却、机械力 化学因素有 ：酸、碱、盐、溶剂、表面活性剂、重金属、蛋白酶。 酶失活过程的动力学 未反应时的失活动力学 k d 表征方法（数学模型） ：一级失活模型 E D 注: E--具有活性的酶 D --失活的酶 kd--衰变常数 模型中： ＝1 时，底物对酶失活无影响 ＝0 时，酶完全被底物所保护 3 生物反应工程原理复习资料 编辑 陈豪 张会 刘应刚 0< <1 时，底物对酶有部分保护作用 >1 时，底物加速酶的失活 因此，称 为底物对酶稳定性影响系数 影响固定化酶促反应的主要因素 : 子构象的改变、位阻效应、微扰效应、分配效应 （可用 Kp 定量描述）、扩散效应 （可定量描述） 评价酶反应器指标 ：转化率、产率、选择性、停留时间 均相酶反应器的分类： 批式反应器（间歇反应器） 按操作方式 连续反应器 半间歇反应器 批式反应器 将底物一次加入反应器内，在反应的过程中无底物和产物的输入和输出，底物和产物的 浓度 随反应时间变化 连续反应器 底物等连续输入反应器，产物连续从反应器输出，反应器的任何部位的各组分均 不随反应时 间变化（稳定态） 半连续反应器 在一次反应的过程中，底物分次补入 批式全混型反应器（间歇式搅拌罐反应器） （batch stirred-tank reactor ， BST