实验三超氧化物歧化酶提取及活性测定.pptVIP

生物技术综合实验 实验三 超氧化物歧化酶(SOD)的提取及活性测定 目的和要求 通过植物材料(玉米)超氧化物歧化 酶(s○D)的提取及活性测定,掌握硫 酸铵盐析沉淀蛋白质及超滤浓缩蛋白质的 方法和原理。 二、实验原理 ■超氧化物歧化酶(SOD)广泛存在于植物 体内,它是一种重要的自由基清除剂,对 生物体有多种保护作用。超滤是一种蛋 质浓缩方法,只要选择适当的滤膜可将玉 米浆中的S○D与其他小分子杂蛋白、可溶 性糖等分离。 材料与试剂 1.材料 玉米籽粒 2.主要试剂 1、0.05mo儿L磷酸缓冲液(pH7.8),500mL 2、氯仿-乙醇混合液:氯仿:无水乙醇=3:5 ■3、丙酮:用前需预冷至4-10℃ ■4、0.05mo/L碳酸盐缓冲液(pH10.2) 5、0.1mo/ LEDTA溶液 123仪器 ■恒温水浴锅 ■冷冻高速离心机、 ■可见分光光度计 ■研钵、玻棒、烧杯、量筒,等