[生化]生物氧化总结.ppt

ATP ATP ATP 氧化磷酸化偶联部位 结论 * 优选 （二） 氧化磷酸化的偶联机理 1. 化学渗透假说(chemiosmotic hypothesis) 电子经呼吸链传递时，可将质子（H+）从线粒体内膜的基质侧泵到内膜胞浆侧，产生膜内外质子电化学梯度储存能量。当质子顺浓度梯度回流时，其能量驱动ADP与Pi生成ATP。 了解 * 优选 因提出氧化磷酸化偶联机制：化学渗透学说而在1978年获诺贝尔化学奖的Peter D Mitchell 氧化磷酸化依赖于完整封闭的线粒体内膜； 线粒体内膜对H+、OH－、K＋、Cl－离子是不通透的； 电子传递链可驱动质子移出线粒体，形成可测定的跨内膜电化学梯度； 增加线粒体内膜外侧酸性可导致ATP合成，而线粒体内膜加入使质子通过物质可减少内膜质子梯度，结果电子虽可以传递，但ATP生成减少。 化学渗透假说已经得到广泛的实验支持。 线粒体基质 线粒体膜 + + + + - - - - H+ O2 H2O H+ e- ADP + Pi ATP 化学渗透假说简单示意图 电子传递给氧释出的能量推动质子泵 将H+泵至内膜胞液侧，形成化学梯度（势能） 当H+顺梯度回到基质面时，释出的能量使ADP 磷酸化为ATP Ⅲ Ⅰ Ⅱ Ⅳ F0 F1 Cyt c Q NADH+H+ NAD+ 延胡索酸 琥珀酸 H+ 1/2O2+2H+ H2O ADP+Pi ATP 4H+ 2H+ 4H+ 胞液侧 基质侧 + + + + + + + + + + - - - - - - - - - 电子传递过程复合体Ⅰ (4H+) 、Ⅲ (4 H+)和Ⅳ (2H+)有质子泵功能。 1. ATP合酶 ATP合酶结构模式图 催化亚基 （三）质子顺梯度回流释放能量被ATP合酶利用催化ATP合成 F1:亲水部分 组成：α3β3γδε,OSCP, IF1亚基 功能：催化ATP生成。 F0:疏水部分 组成：a, b2, c9~12亚基 功能：构成质子通道，将 质子梯度产生的能 量导向F1。 ATP合酶组成可旋转的发动机样结构 F0的2个b亚基的一端锚定F1的α亚基，另一端通过δ和α3β3稳固结合，使a、b2和α3β3、δ亚基组成稳定的定子部分。 部分γ和ε亚基共同形成穿过α3β3间中轴，γ还与1个β亚基疏松结合作用，下端与嵌入内膜的c亚基环紧密结合。c亚基环、γ和ε亚基组成转子部分。 质子顺梯度向基质回流时，转子部分相对定子部分旋转，使ATP合酶利用释放的能量合成ATP。 寡霉素 柄部: 存有其他亚基，其中一个称为寡霉素敏感蛋白（OSCP)，在寡霉素存在时使ATP合酶不能合成ATP。 当H+顺浓度递度经F0中a亚基和c亚基之间回流时，γ亚基发生旋转，3个β亚基的构象发生改变。 ATP合酶的工作机制 （2）ATP合成的结合变构机制(binding change mechanism) L结合ADP和Pi；T合成ATP；O释放ATP。 三、氧化磷酸化作用可受某些内外源因素影响 （一）有3类氧化磷酸化抑制剂 1、呼吸链抑制剂 复合体Ⅰ抑制剂：鱼藤酮(rotenone)、粉蝶霉素A(piericidin A)及异戊巴比妥(amobarbital)等阻断传递电子到泛醌 。 复合体Ⅱ的抑制剂：萎锈灵(carboxin)。 复合体Ⅲ抑制剂：抗霉素A(antimycin A)阻断Cyt bH传递电子到泛醌(QN) ；粘噻唑菌醇则作用QP位点。 复合体Ⅳ 抑制剂：CN－、N3－紧密结合中氧化型Cyt a3，阻断电子由Cyt a到CuB- Cyt a3间传递。CO与还原型Cyt a3结合，阻断电子传递给O2。 作用：阻断电子传递 NADH FMN (Fe-S) 琥珀酸 FAD (Fe-S) CoQ Cyt b→Cyt c→Cyt c Cyt aa3 O2 鱼藤酮 粉蝶霉素A 异戊巴比妥 × 抗霉素A 二巯基丙醇 × CO、CN-、 N3-及H2S × 各种呼吸链抑制剂的阻断位点 H＋膜内外电化学梯度 电子传递使H＋跨膜转移 H＋经ATP合酶的F0 单元回流 ATP合成 H＋经从其它途径回流 能量以热能散失，不能合成ATP 呼吸链正常 2、解偶联剂破坏电子传递建立的跨膜质子电化学梯度 作用：使氧化过程与磷酸化过程脱节 举例：2，4-二硝基苯酚、解偶联蛋白。 解偶