《细胞生物学》第12章细胞增殖及其调控.ppt

ATM（ataxia telangiectasia-mutated gene） 最早发现于毛细血管扩张性共济失调症患者，人类中大约有1%的人是ATM缺失的杂合子，表现出对电离辐射敏感和易患癌症。 ATM编码一个蛋白激酶，结合在损伤的DNA上，其信号通路有两条。 – ①激活Chk1（checkpoint kinase）, 使CDC25的Ser216磷酸化失去活性，抑制M-CDK的活性，中断细胞周期。 – ②激活Chk2，使P53被磷酸化而激活，然后P53作为转录因子，导致P21的表达，P21抑制G1-S期CDK的活性，中断细胞周期。 生长因子对细胞增殖的影响 细胞的增殖与信号途径有关。 生长因子：是与细胞增殖有关的信号物质，已知几十种，多数能促进细胞增殖，又称有丝分裂原（mitogen），如PDGF、EGF、NGF、TGFβ。 作用方式：旁分泌。通过与膜上相应受体结合后，激活受体酪氨酸蛋白激酶或丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性，通过不同的信号转导通路，最终影响细胞核内与增殖有关的转录因子活化和基因的转录，从而参与细胞增殖、转化甚至癌变的调节。 生长因子对细胞增殖的影响 信号通路：ras途径，cAMP途径、磷脂酰肌醇途径。 – 如通过ras途径，激活MAPK，MAPK进入细胞核内，激活c-myc， myc作为转录因子促进cyclin D、SCF、E2F等G1-S有关的基因表达，细胞进入G1期。 癌基因与细胞增殖 病毒癌基因（v-onc)，病毒癌基因在细胞中的同源基因称为细胞癌基因（c-onc)，未活化的c-onc称为原癌基因（proto-oncogene)。 原癌基因在细胞生长、发育和分化中均起着重要作用，它们被异常活化后可最终导致增殖失控、甚至癌变。 与增殖调控有关的原癌基因和癌基因有生长因子类、生长因子和激素受体类、细胞内信号转导子和核转录因子类。 抑癌基因与细胞增殖 在正常二倍体细胞中存在抑制癌变的隐性基因，而且它们仅在两个等位基因都缺失或失活的情况下才能发生癌变，这些抑制肿瘤形成的基因称为抑癌基因。 Rb和p53是已分离和鉴定出的两类重要的抑癌基因，是肿瘤抑制因子。它们的缺失或突变，导致增殖、分化失控与细胞癌变。 抑癌基因与细胞增殖 磷酸化是pRb参与增殖功能调节的重要调节因素， pRb蛋白被Cdk激酶磷酸化后通过释放结合的转录因子作用于基因转录，从而推进细胞周期前进。 野生型p53可诱导细胞凋亡。它通过对细胞周期检验点的调控（如DNA损伤检验点等）参与了细胞周期正常运转的调节。现认为p53促进细胞凋亡与抑制肿瘤生长密切相关。 细胞周期蛋白降解对Cdk的调节作用 CDK1的调节与活化; CAK=CDK1-Activiting Kinase 活化的MPF间接激活更多的MPF 要点 细胞周期概念和细胞周期及各时相时间测定方法 人工细胞同步化方法及优缺点比较 细胞周期各时相主要事件 检验点及其意义 细胞周期调控 (PCC MPF 细胞周期蛋白cyclin CDK 泛素-蛋白水解酶复合物系统） Hayflick界限 细胞凋亡的概念 细胞凋亡和坏死的区别 细胞凋亡的形态学和生化特征 细胞分化 奢侈基因与管家基因 癌细胞的基本特点 癌基因和抑癌基因 癌症产生是基因突变积累和自然选择的结果 THE END THE END * * * * * * * PCC G1期PCC的形态学和细胞在G1期位置之间是直接相关的。以秋水仙酰胺处理CHO细胞，然后收集M期细胞，再释放使其进入G1期，继而在不同的间隔与有丝分裂细胞融合，诱导PCC，根据其凝集程度分为1~6级，+1是最凝集的，而+6是最伸展的，故依其分级可确定其在早G1（1~3）或晚G1（4~6）期。正常细胞多阻断于早G1期，而转化细胞或癌细胞在一定条件下多阻断于晚G1期，故PCC可以用于细胞周期的分析。 有丝分裂因子（mitotic factors) 早在1960s，Yoshio Masui发现成熟蛙卵的提取物能促进未成熟卵的胚胞破裂(Germinal Vesicle Breakdown，GVBD)，后来Sunkara将不同时期Hela细胞的提取液注射到蛙卵母细胞中，发现G1和S期的抽取物不能诱导GVBD，而G2和M期的则具有促进胚胞破裂的功能，它将这种诱导物质称为有丝分裂因子(MF)。 后来在CHO细胞，酵母和粘菌中也提取出相同性质的MF。这类物质被统称为MPF(成熟促进因子,maturation promoting factor) 细胞周期控制 细胞周期和其他的一些细胞生理过程就像多米诺骨牌 细胞周期中的两个主要关卡 细胞进出M期的调控 细胞进出S期的调控 1960s Leland Hartwell,1970s Paul