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活性污泥中微生物分离纯化与培养 中国环境管理干部学院 环境技术研究与实验中心 TWAT 实验目的 1、掌握从环境(水体或活性污泥)中分离培养细菌的方法,从 而获得若干种细菌纯培养技能。 2、掌握几种接种技术。 二、实验器材及设备 1、无菌培养皿(直径90毫米)、无菌吸管、无菌锥形瓶、无菌 试管、5管无菌水(每管有9毫升灭菌过的自来 2、营养琼脂培养基(已灭菌的)、活性污泥 3、接种环、酒精灯、恒温箱(培养箱)、超浄工作台等 TWAT 细菌纯种分离的操作方法 细菌纯种分离的方法有两种:稀释平板法和平板划线法 (一)稀释平板分离法 1、取样从活性污泥法曝气池中取活性污泥若干,于无菌烧 杯中(取用有代表性的样品)。 2、稀释水样 将1瓶90毫升和5管9毫升的无菌水排列好,按101、102 103、104、105及106依次编号。在无菌操作条件下,用10 毫升的无菌移液管吸取10毫升水样置于第一瓶90毫升无菌水 (内含玻璃珠)中 液管吹洗三次,用手摇10分钟将颗粒 状样品打散。即为10-浓度的菌液。用升无菌移液管吸取 度的菌液于一管9毫升无菌水中,将移液管吹 次,摇匀即为102浓度菌液。同样方法,依次稀释到106。 稀释过程如图 TWAT 培幕 I ml I nt I nl i ml B③③③○ 样品稀释过程 TWAT 3、平板的制 取10套无菌培养皿编 度小的10-6菌 吸取0