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? 样品准备 →辐照灭菌 ? 将待检材料在相应条件下浸提(不含血清的培养基中在37℃环境下浸 提24h) ? 细胞计数 ? 接种于96孔培养板,置CO2培养箱37℃培养24h后,弃去原培养液。空 白对照组加入新鲜细胞培养液,供试品加入样品浸提液(加血清),置 CO2培养箱继续培养(至少24h) ? 于设定培养时间后置显微镜下观察细胞形态,每孔加入20μL质量浓度 为5g/L的MTT溶液,继续培养4h后弃去孔内液体,加入200μL DMSO,在 酶标仪570 nm波长下测定吸光度,计算相对增值率(RGR)。 细胞毒性评价:根据下式计算相对增殖率(Relative growth rate, RGR 。 RGR =实验组OD均值/阴性对照组OD均值×100% 级别 0 1 2 3 4 相对增值率/% ≥100 80-99 50-79 30-49 0-29
? ? ? ? ? ? ? 将样品放入培养器皿内 ? 从细胞悬浮液中吸取等量的悬浮液,注入与试验 样品直接接触的每只器皿里 合适条件培养(最少24h 如有需要可换液 固定细胞(戊二醛稀释液) 梯度脱水 临界点干燥 扫描电镜观察
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