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实验1-3溶菌酶的提取分离及鉴定
(酶活力、纯度及分子量测定)
实验内容
1.溶菌酶的粗提取
2.溶菌酶的分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定
3.溶菌酶纯度鉴定与分子量测定
背景知识
溶菌酶( lysozyme):胞壁质酶( muramidase)或N-乙酰胞壁质
聚糖水解酶(N- acetylmuramide glycanohydrlase),是-种能水
解致病菌中黏多糖的碱性酶。
生物学效应:主要通过破坏细胞壁中的N乙酰胞壁酸和N-乙酰
氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可
溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸岀而使细菌溶解。该酶活
性可被一些金属离子Cu2,Fe2+,Zn2+以及N-乙酰葡萄糖胺所抑
制,能被Mg2+,Ca2+、NaC所激活
M乙酸
N乙固壁酸
溶菌酶作用位点
B-1.4糖苷健
青素作用位点
G“对其敏感
staphylococcus aureus
peptidoglycan
G·细胞壁肽聚糖组成
(缺壁0+:原生质体
溶菌酶理化性质:相对分子质量14700Da,由
129个基酸残基构,pI:-10.8,最适温度为
50℃,最适pH为6~7左右。28nm的消光系数
为13.0
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