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实验五
细菌的菌落计数
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、目的要求
1.学习平板菌落计数的基本原理和方法,并掌
握其基本技能
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、实验原理
板分离法中的稀释涂布平板法,能有效分离纯化微生物外,还可用
测定样品中活菌数量
平板菌落计数法是将待测菌液经适当稀释,涂布在平板上;经过培养
后在平板上形成肉眼可见的菌落。统计菌落数,根据稀释倍数和取样
量计算出样品中细胞密度。由于待测样品往往不易完全分散成单个细
胞,平板上形成的每个菌落不一定是单个细胞生长繁殖而成,有的可
能来自2个或多个细胞。因此,平板菌落计数的结果往往比样品中实
际细胞数低,这就是现在使用菌落形成单位( colony- forming unit
CFU)取代以前用绝对菌落数来表示样品活菌含量的原因。
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三、实验器材和试剂
酒精灯,记号笔,标签,火柴,灭菌培养m
菌种,平板,培养基
四、实验操作0
、编号
取无菌牛肉膏蛋白胨培养皿9套,分别用记号笔标明10-4
105、10-6(稀释度)各3套。另取6支盛有4.5m无菌水
的试管,依次标明10-1、10-2、10-3、、、10-6。
2、稀释
用1m无菌吸管准确吸取05m已充分混匀的大肠杆菌培
养液(待测样品),加入标有10-1字样的试管中,此为1
0倍稀释。将10-1试管在手掌或置震荡器上震荡,使菌液
充分混匀。接着取0.5m10-1菌液精确地放入10-2试管
中,此为100倍稀释……其余依次类推
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