Q_AHLHSW0001-2020器官芯片药物检测规范.pdf

Q/AH 安徽骆华生物科技有限公司企业标准 Q/AHLHSW0001-2020 器官芯片药物检测规范 2020-5-30 发布 2020-5-30 实施 安徽骆华生物科技有限公司 发布 I Q/AHLHSW0001-2020 前 言 本不校准于2020年5月30 日首次发布。 本标准有效期3年，应适时修订或到期复审。 本标准由安徽骆华生物科技有限公司提出。 本标准起草单位：安徽骆华生物科技有限公司技术部。 本标准主要起草人：苗春光。 I II Q/AHLHSW0001-2020 1 范围 本标准规定了肿瘤样本的取样及运输规范。 本标准规定了原代肿瘤细胞的要求、试验方法、检验规则、包装、运输和贮 存。 本标准适用于经分离、装瓶/皿培养、传代培养、细胞回收等工艺产生的原 代肿瘤细胞。 本标准适用于原代细胞的芯片内培养及器官芯片上药物的检测。 2 规范性引用文件 2.1 《中国药典》2010版第二部 2.2 《中华人民共和国卫生部卫生部药品标准》中药成方制剂1-20册 2.3 《中华人民共和国卫生部卫生部药品标准》化学药品及制剂 3 名词术语 3.1 原代细胞 细胞直接来源于机体组织，生物性状尚未发生大的变化，在一定程度上能够 反映体内的状态且在10代以内培养的细胞。 3.2 细胞三维培养 将具有三维结构不同材料的载体与各种不同种类的细胞在体外共同培养，使 细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移和生长，构成三维的细胞-载体复合 物。 3.3 器官芯片 模拟整个器官和器官系统活动、力学特性和生理反应等多通道3D 微流体细 胞培养芯片。 3.4 药物筛选 采用微流控芯片技术，对可能作为药物使用的物质(采样)进行生物活性、药 理作用及药用价值的评估过程。 4 分类 4.1 样品的采集运输 取样人员提前将装有试剂的无菌管放入低温运输箱中并携带至采样所在医 院，样品完整放入无菌管后置于低温运输箱保存并带回实验室。 4.2 细胞的分离提取 手术样 酶消化法 对肿瘤组织清洗剪切，保留肿瘤细胞丰富的区域后将其剪碎，加入消化液消 II III Q/AHLHSW0001-2020 化，消化结束后，终止消化，然后离心去上清，重悬细胞，最后放入37℃，5%CO2 培养箱中培养。 组织块法 对肿瘤组织清洗剪切，保留肿瘤细胞丰富的区域后将其剪碎，将剪切好的组 织，均匀摆置在培养皿中，放置 1-2h，待组织块贴壁后，缓慢添加培养液，放入 37℃ 5%CO2 ， 培养箱中培养。 穿刺样处理方法 若穿刺样中有组织块按手术样方法处理，没有组织块处理方法如下： 拿到样本后，离心，去上清，加入红细胞裂解液，静置后离心去上清，再用 PBS清洗，离心去上清后重悬细胞，放入37℃，5%CO2 培养箱中培养。 4.3 细胞的培养与传代 37℃ 5%CO2 将分离提取好的细胞放入 ， 培养箱中培养，待细胞长满至培养 皿的80%左右，用胰蛋白酶对细胞进行消化。 4.4 细胞的三维培养