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高效毛细管电泳
内容摘要
1概述
2基本理论
3毛细管电泳仪
4电极液
5进样方式
6毛细管电泳的分离模式
1概述
1.1高效毛细管电泳提出
高效毛细管电泳( High Performance Capillary Electrophoresis
简称HPCE),广义的说,是泛指在极细的管内实现具有
高效、快速、灵敏度高的一大类电泳分析技术,称之为高
效毛细管电泳
高效毛细管电的发展过程大致分为以下几个阶段
1967年 Hjerten首先提出在高电场强度下,采用管径为3mm
的毛细管进行白由溶液的区带电泳
1974年Ⅴian采用内径为200-500μm的毛细管进行电泳,
使毛细管的内径缩小了6-15倍。
1981年 Jorgenson和 Lukas使用内径为75um的毛细管进行
电泳,使毛细管的内径缩小了3-6倍
1984年 Terabe等把胶束电泳技术引入到毛细管电泳中,为
今后发展新型的毛细管电泳分离模式提供了依据。
1987年H. Merten把等电聚焦电泳、凝胶电泳引入到毛细管
电泳中。
1989年改用10-25um的毛细管电泳,并获得满意的分离效果
1994年又推出了2-5μm的毛细管柱,使得毛细管电泳在
分析领域有了很大的发展。
12HPCE的优点:
(1)毛细管内径小,电泳时使用的电流小
(2)毛细管中心与外界的距离很短,电泳产生的焦耳热很
快被散去,有效防止电泳条带的扩散。
(3)既具有电泳高分辨率的功能,有具备高效液相层析的
优点
(4)电极液用量少,不破坏生物样品,检测灵敏度高,用
激光诱导荧光检测器灵敏度可达1019g
(5)结构简单,操作方便,自动化程度高
13常用术语:
(1)电泳速度( Electrophoretic Velocity,简称vep)
在单位时间内,带电粒子在毛细管内,作定向运动的
距离。电泳速度的单位用cm/sec表示
Vep=ld/tm
Ld:毛细管入口端至检测器长度
tm:电泳时间
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