色谱柱的选择-博纳艾杰尔科技复习课程.ppt

。 。 。 。 。 。 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 优点： 平均孔径了粒径范围可控（1.7, 1,8, 2.7, 3, 5, 10 μm） 机械强度高－耐压，稳定 柱效最高 兼容有机溶剂 表面性质易于修饰 缺点 碱性条件下溶解 表面酸性不适宜分离碱性化合物 * 幻灯片制作：WSY18 液相色谱柱的选择 杨定忠 博纳艾杰尔科技 156119833289；dz_yang@客 服：400-606-8099 2010年11月12月 广东 影响C18色谱柱性能的主要因素 色谱柱与色谱填料的特性 1、 柱填料 硅胶纯度 粒径 比表面积 孔径 2、 色谱柱的构型 色谱柱直径 色谱柱长度 3、 固定相 键合类型 残余硅羟基的影响 反相键合相的保留行为 键合硅胶的稳定性 物理因素 化学因素 柱填料对色谱柱性能的影响 柱填料对C18色谱柱性能的影响：硅胶纯度II 硅胶纯度－金属含量 d 柱填料对C18色谱柱性能的影响：粒径 硅胶粒径和类型对柱效的影响 d 硅胶粒径和类型对压力的影响 柱填料对C18色谱柱性能的影响：粒径II 目前市场主要可供选择的填料粒径 1.7μm，1.8μm，2.2μm － 快速液相色谱柱：匹配快速色谱仪 2.7μm － 多孔壳层：在常规液相色谱仪上实现快速分离(Halo) 3.0μm，3.5μm － 普通快速分析 5.0μm － 常规分析 颗粒越小，柱效越高, 但是耐污染性能下降，柱压升高. 柱填料对C18色谱柱性能的影响：比表面积 每克填料的表面积，与粒度，孔径有关 比表面积大，保留增加，载样量增加，平衡时间增加(梯度洗脱尤为注意) 根据需要选择合适的比表面积 柱填料对C18色谱柱性能的影响：孔径I 多孔材料的95%以上表面在孔内部 样品分子直径小于平均孔径，才能进入微粒内部 孔径至少是样品流体学直径的4倍 300?孔径用于：超过50个氨基酸的肽或25个残基的低聚寡核苷酸 样品分子直径小于平均