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第二章 植物组织器官培养 第一节 器官形成 二、愈伤组织诱导 四、外植体的器官发生途径 五、影响器官分化的因素 第二节 体细胞胚胎发生 二、体细胞胚发生的途径及类型 三、影响体细胞胚胎发生的因素 第三节 胚培养(embryo culture) 第四节 胚乳培养 第五节 离体授粉 第六节 人工种子 复 习 题 * * 第一节 器官形成 第二节 体细胞胚胎发生 第三节 胚培养 第四节 胚乳培养 第五节 离体授粉 第六节 人工种子 一、概 念 植物器官组织培养 就是在植物细胞全能性理论 的指导下,在组织以及器官 的水平上开展研究的,其目 的是实现植物细胞的全能性 以完成植物生命周期的过程。 器 官 形 成 1 愈伤组织的形成过程 启动期,又叫诱导期 分裂期 分化期 二、愈伤组织诱导 器 官 形 成 2 影响愈伤组织形成的因素 外植体 基本培养基 激素组合 三、器官分化 器 官 形 成 植物细胞全能性 实现植物细胞全能性的途径 以植物体细胞为材料 以植物性细胞为材料 以植物单细胞来源的原生质体或已融合的原生质体为材料 细胞的脱分化与再分化 三、器官分化 器 官 形 成 器官分化与植株形成 器官分化有两种情况: 一种是直接从外植体细胞上形成器官原基后发育成器官 另一种是先形成愈伤组织后形成不同的器官原基 通过器官发生再生植株的方式有3种: 先分化芽,再分化根 先分化根,再分化芽 在愈伤组织块的不同部位上分化出根和芽 器 官 形 成 腋芽萌发 不定芽发生 直接不定芽 间接不定芽 体细胞胚胎发生 器 官 形 成 培养基成分 激素组合 矿质元素 有机成分 环境条件 光照 温度 湿度 植株材料 品种基因型的差异 材料的生理状况 不同的器官分化类型 一、概念与特点 1 概念 是指在植物组织培养中起源于1个非合子细胞,经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的胚状结构,通常称胚状体。 2 特点 具有明显的两极性 遗传的稳定性 发生数量大,增殖率高 体细胞胚胎发生 1 途径 直接 途径:从外植体某个部位直接诱导分化出体细胞胚 间接 途径:首先形成愈伤组织,其后在愈伤组织表面分化形成体细胞胚。 二、体细胞胚发生的途径及类型 体细胞胚胎发生 2 类型 外植体上直接发生二倍性体细胞胚 愈伤组织形成胚状体:胚胎发生丛(embryogenic clump,EC) 悬浮细胞形成胚状体:其过程类似于愈伤组织 单细胞胚胎发生途径 可分大、小孢子胚胎发育 二、体细胞胚发生的途径及类型 小孢子胚胎发育 小孢子经正常的有丝分裂后仅有营养细胞参与花粉胚的发育,如甜椒 小孢子经有丝分裂后形成两个均等的细胞共同参与花粉胚的发育,如柑橘 小孢子经有丝分裂后形成大的营养细胞和小的生殖细胞,两者同时发育,通过核融合形成多细胞团共同参与花粉胚的发育,如毛叶曼佗罗。 大孢子胚胎发育 二、体细胞胚发生的途径及类型 有起源于卵细胞的,如莴苣 有起源于反足细胞的,如向日葵 有起源于极核的,如大麦 有减数分裂后发育形成胚状体的,如烟草 有减数分裂之前发育形成胚状体的,如百合 器 官 形 成 外植体的遗传背景 外植体的生理年龄 植物激素 矿质元素 有机化合物 其它因素 一、胚培养的意义 用于基础研究 打破种子休眠 克服珠心胚的干扰 诱导胚状体及胚性愈伤组织 种子生活力的快速测定 用于胚的挽救 柑橘等为多胚性植物,除正常有性胚以外,还可以从珠心组织发生多个不定胚,这些不定胚常侵入胚囊,使合子胚发育受阻,影响杂交育种效率。 二、离体胚培养的发育方式 合子胚发育途径 脱分化形成愈伤组织 早熟萌发 合 子 球 形 胚 心 形 胚 鱼雷形胚 子叶形胚 种 子 第三节 胚培养 三、胚培养方法 外植体消毒与接种 培养基 培养的外部条件 分为成熟胚和 原胚的培养 生长调节剂及其它附加物 一、胚乳培养的意义 获得三倍体 是研究淀粉、蛋白质、脂类等天然代谢产物的理想系统。 第四节 胚乳培养 二、胚乳培养的方法 胚乳培养材料的选择 游离核型期 细胞型期 玉米8-12天,梨20天,小麦8天,黄
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