酶免疫分析技术在生物药物分析中的应用课件.pptVIP

操作步骤 1 、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温 (20-25 ℃ ) 平衡 30min 以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。 2 、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放入自封袋，保存 于 2-8 ℃ 。 3 、洗涤工作液在使用前也需回温。 4 、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准 品做 2 孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。 31 5 、加标准品 / 样本：加入标准品 / 样本 20ml 到对应的微孔中，加 入酶标二抗 50ml/ 孔，再加入抗体工作液 80ml/ 孔，轻轻振荡 混匀，用盖板膜盖板后置 25 ℃ 避光环境中反应 40min 。 6 、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液 250ml/ 孔，充分洗涤 4 － 5 次，每次间隔 10s ，用吸水纸拍干。 7 、显色：加入底物液 A 液 50ml/ 孔，再加底物液 B 液 50ml/ 孔， 轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置 25 ℃ 避光环境中避光反应 15min 。 8 、测定：加入终止液 50ml/ 孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于 450nm 处（建议用双波长 450/630nm 检测，在 5min 内读完数 据），测定每孔 OD 值。 32 第四节 酶免疫分析技术在生物药物分析中的应用 其应用主要包括以下几个方面： ? 药物含量（活性）测定 ? 宿主蛋白残留检测 ? 抗