2019年05定性试验质控.pptVIP

摘自《中国输 血》杨芳，邢 文革等 CUT OFF 值的验证方法 （ 1 ）阴性来源： 选择没有疾病的健康人和非讨论疾病患者 的病人的新鲜血清共 120 份，分 3-5 批 3-5 天 进行检测，计算 X 、 s ， CUT OFF 验证值为： X+3s ； （ 2 ）阳性来源： 选择弱阳性（ CUT OFF 值± 20% ）新鲜 血清或质控血清共 120 份，分 3-5 批 3-5 天进 行检测，计算 X 、 s ， CUT OFF 值验证值为 :X-3s 。 x 按照 EP12 文件找 C50 会出现给定 C50 与实测 C50 的区别 应用的前提是以含量为基础，在 C5 和 C95 间有线 性关系 infection. for many microbiological qualitative tests is no recognized reference material. For many such antigen or antibody tests, Users must then rely on the labeling provided by the manufacturer for specific information on how the cutoff or limit of blank was established; or gain experience with the device in their patient population to correlate test results with clinical findings. CUT OFF 验证值用于 （ 1 ）灰区的设定； （ 2 ） Leuey-Jennings 质控框图的控制 限确定。 美国 CAP 要求 CUT OFF 值每六个月验 证一次，我们建议更换试剂批号就应 进行验证。实验室为适应这样的要求 可以调整订购试剂的习惯，尽量在较 长一段时间内使同一批号的试剂。 质控物的选择 基质：应尽量选择人血清基质，工程菌或 动物源性的基质由于人体内有大量的异嗜 性抗体的存在引起非特异或中和反应造成 假失控。稀释液也应用人血清，冻干品复 溶可以使用生理盐水，避免使用动物源性 的小牛血清等。 稳定性：室内质控需要观察一段时间，一 般选择生产者声明在一定保存条件下如 2- 8 ℃或 -20 ℃以下有效期为 6 个月以上。要特 别注意开瓶有效期和冻干质控物复溶后分 装瓶的有效期与原装瓶有效期的区别，通 常前二者的有效期要短许多。实验室应对 这些有效期进行验证。 质控物数量、实验位置和频次：质控物数量应满足一个 批号至少半年的实验量。每分析批至少安排一个弱阳性 和一个阴性质控，检测位置不能固定而应随机放置。试 剂盒所设的阴、阳性内对照是用来计算 CUT OFF 值或 阈值的，也有相应的有效性判断标准，但只能在同批号 试剂内使用，不能作为质控指标，质控必须是可以监控 到不同批号试剂间的变化的外对照。 浓度范围：应围绕该 CUT OFF 值选择。一般建议阳性 质控物浓度为 2 × CUT OFF 值左右，阴性质控物浓度 为 0.5 × CUT OFF 值左右。高值或超高值阳性血清是用 来监控“ HOOK 效应”的，应该在引进分析方法或试剂 盒时评价，不需要长期监控，同时其测定值远高于 CUT OFF 值对边缘结果的监控也无任何价值。 灭活：尽管所有的制造商或生产者均声明对已知 的经血传播的病原体如乙肝、丙肝、艾滋、梅毒 等病原体进行了灭活处理，但应把质控物视为有 传染性，因为可能存在灭活不完全以及其他未知 的传染性，实际工作中应按生物安全防护的规定 进行操作。 冰冻血清的融化和冻干品复溶：免疫活性的质控血清一 般需在 -20 ℃以下长期保存，从冰箱取出后建议室温自 然融化，一次性使用可以 37 ℃水浴或孵箱快速融化，轻 柔地颠倒混匀 5 次以上；融化的血清置 4-8 ℃保存，而不 应该再次 -20 ℃以下保存、反复冻融。冻干质控品用生 理盐水（非蒸馏水，除非有特殊说明）复溶，按规定的 量准确（应保证每瓶操作的一致性）加入质控品容器中， 盖盖后轻柔地颠倒 10 次以上，保证充分溶解和混匀；安 琣瓶应先轻敲摇晃使顶部的冻干粉掉入底部，用砂轮划 开颈部轻敲顶部使其掉落在锐器盒中，加样器加生理盐 水后反复抽吸 10 次以上。所有操作应避免气泡产生。复 溶后的质控品置 4-8 ℃保存，也可分装小份置 -20 ℃以下 保存，只允许冻融一次。融化、复溶、分装后的血清均 在标签上标志操作日期、有效期