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思考:
1.什么是基因工程?它的原狸是什么?
(1)概念:基因工程是指在体外通过人工“剪切”和
“拼接”等方法,对生物的基因进行改造和
重新组合,然后导入受体细胞,并使重组基因
在受体细胞中表达,产生人类需要的基因产
物的技术
(2)原理:基因重组。
2.基因工程的工具有哪些?作用分别是什么?
(1)限制性核酸内切酶:
识别特定的核苷酸序列,并在合适的反应条件
下使每条特定部位的2个核苷酸之间的磷酸二酯键
断开,从而切割DNA分子。也被称为“分子手术刀”
(2)DNA连接酶
将双链的DNA片段连接起来,恢复被限制
性核酸内切酶切开的脱氧核糖和磷酸之间的
磷酸二酯键_。也被称为“分子缝合针”(分子针线
(3)载体:
作为运载工具,将外源基因(目的基因)导入
受体细胞,使其在受体细胞中稳定遗传和表达。
①常用的载体
质粒、噬菌体以及一些动植物病毒等
②最早、最常用的载体:质粒
是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之
外的并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子
作为载体,质粒至少包括三个部分
①复制区:含有复制原点——说明质粒能复制并能带着
插入的目的基因一起复制
②遗传标记基因:可用于鉴定与筛选重组DNA分子
如“氨苄青霉素抗性基因
说明有标记基因
的存在,将来可用含青霉素的培养基鉴别
③目的基因(外源基因)的插入位点:即限制性核酸内切
酶的切割位点(如 ECoR I的切割位点)—便于
外源DNA分子的插入。
第一章基因工程
第一节基因工程概述
四、基因工程的一般过程与技术
基因工程的基本操作程序
1、目的基因的获取
2、基因表达载体的构建
3、将目的基因导入受体细胞
4、目的基因的检测与鉴定
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