2019年思考转基因抗虫棉的大致培育过程？.ppt

思考 : 转基因抗虫棉的大致 培育过程 ? 基因工程的基本操作程序 一、目的基因的获取 二、基因表达载体的构建 三、将目的基因导入受体细胞 四、目的基因的检测与鉴定 一、目的 基因 的获取 主要是编码蛋白质的结构基因 1 、从基因文库中获取目的基因 2 、利用 PCR 技术扩增目的基因 3 、化学方法人工合成 获取目的基因常采用的方法： 1 、从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片断， 导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有 这种生物的不同基因，称为基因文库。 基因文库 基因组文库 部分基因文库 (CDNA 文库 ) 某生物体内 全部 DNA 许多 DNA 片段 受体菌群体 1 、从基因文库中获取目的基因 限制酶 与运载体连接 导入 基因组文库 某种生物某个时期的 mRNA cDNA 反转录 受体菌群体 与运载体连接 导入 部分基因文库 （ cDNA 文库） 2 、利用 PCR 技术扩增目的基因 聚合酶链式反应，在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。可以获得大量的目的基 因。 循环 变性 退火 延伸 二 . 基因表达载体的构建 ----------- 核心 基因表达载体的构建过程 质粒 DNA 分子 限制酶处理 两个切口 获得目的基因 DNA 连接酶 重组 DNA 分子（重组质粒） 同一种 一个切口 两个黏性末端 三、将目的基因导入受体细胞 转化 ? 常用的受体细胞： 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、 酵母菌和动植物细胞等。 ? 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 三、将目的基因导入受体细胞 1. 将目的基因导入植物细胞 ---- 农杆菌转化法 转化 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 三、将目的基因导入受体细胞 1. 将目的基因导入植物细胞 转化 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 2. 将目的基因导入动物细胞 显微注射技术