公开课分解尿素的细菌分解纤维素的微生物的分离剖析.ppt

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2. 纤维素酶 纤维素酶是一种 复合酶 ,一般认为它 至少包 括三种组分 ,即 C 1 酶 ( 外切酶 ) 、 C X 酶 ( 内切酶 ) 和 葡萄糖苷酶 ,前两种酶使纤维素分解成纤维二 糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 纤维二糖 C 1 酶、 Cx 酶 葡萄糖苷酶 葡萄糖 纤维素 一、基础知识 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质, 植物每年产生的纤维素超过 70 亿吨,其中 40%- 60% 能被土壤中能产生纤维素酶的微生物所利用, 不会大量积累。 在草食性动物等的消化道内,也 共生有 分解纤维素的微生物 ,其原理也是产生纤维 素酶而分解纤维素,而人没有分解纤维素的 能力。 人类可应用分解纤维素的微生物将秸 秆等废弃物转变成酒精,用纤维素酶处理 服装面料等。 3 、纤维素的分解 请用一个简单的实验来验证此问题 纤维素酶水解滤纸实验 → 1U 表示 1 个酶活力单位,是指在温度为 25 ℃ ,其他反应条件, 如 pH 等,均为最适的情况下,在 1min 内转化 1mmol 的底物所需 的酶量。 底物:酶所作用和催化的化合物。 试管 A B 滤纸条 1cm x 6cm 1cm x 6cm 缓冲液 10ml 11ml 纤维素酶 1ml / 振动 1h 1h 现象 分解 不分解 纤维素酶的作用对照实验 ( 2 )纤维素分解菌的筛选 1 、筛选纤维素分解菌的方法 ______________ 。 该方法可以通过 ________ 反应直接筛选。 刚果红染色法 颜色 2 、其原理是:刚果红可以与纤维素形成 ____________ , 但不能和水解后的纤维二糖和葡萄 糖发生这种反应 。当纤维素被 _________ 分解后, 红色复合物无法形成,出现以 _____________ 为中心的 ________ ,可以通过 ___________________________ 来筛选纤维素分解菌。 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 实验原理 即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 可根据是否 产生 透明圈 来筛选纤维 素分解菌 练一练: 1. 下列关于纤维素酶的说法,错误的是 A. 纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种 B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖 2. 利用刚果红法可以筛选出纤维素分解 菌,下列说法错误的是 A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈,则说明已筛 选出了纤维素分解菌 ( 三 ) 、实验设计 土壤 取样 选择 培养 梯度 稀释 将样品涂 布到 鉴别 培养基 挑选 菌落 什么 样的 环境 取样 ? 培养的目的 ? 挑选什 么样的 菌落 ? ①鉴别培养基 的特点 ? ②如何鉴别 ? 根据 :微生物 对生存环境的 要求,到相应 环境中去找; 目的: 增加纤维素 分解菌的浓度, 以 确保能够从样品中 分离到所需要的微 生物; 刚果红染色法 对比课题 3 与课题 2 实验流程, 说说它们的不同之处: 课题 2 ——土壤取样,直接稀释。 课题 3 ——土壤取样,选择培养, 增加纤维素分解菌浓度后,再稀释。 1 、纤维素分解菌选择培养基 属于 ______ (固体、液体)培 养基,原因是 __________ 【资料二】选择培养 阅读资料二“选择培养”,回答以下几问题: 液体 没有添加琼脂 2 、该培养基对微生物 _____ (具有,不具有)选择作用。 如果具有,其选择机制是 ___ 具有 能分解纤维素的微生物可利用 纤维素作为碳源而大量繁殖; 其他微生物繁殖被抑制 ①分布环境 1 、土壤取样: 富含纤维素的环境中 操作步骤 生物与环境的互相依存关系,在富含纤维素 的环境中纤维素分解菌的含量相对提高,因此从 这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环 境。 ②原因 将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸 应该埋进土壤多深? 将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实际上是

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