二甲双胍作用机制研究进展关键靶点的核心作用.ppt

. 总结二甲双胍的作用机制：二甲双胍活化AMPK，通过一系列分子水平的作用，抑制肝脏葡萄糖输出，抑制肝脏脂肪合成，促进肝脏脂肪氧化，并促进骨骼肌葡萄糖，进而降低血糖和血甘油三酯。AMPK是二甲双胍的重要作用靶点。 而二甲双胍要激活AMPK，首先需要进入细胞内，然后才能通过一些物质的介导，从而激活AMPK。 Mechanism of metformin action in cells. By controlling the intracellular concentrations, OCT1 is a direct determinant of metformin pharmacological effects in the liver (bold arrow). Passive diffusion and other transporters may account for small portion of hepatic uptake of metformin (dashed arrow). Other transporters may control metformin uptake into other tissues, such as skeletal muscle. Factors such as genetic variation in transporter genes may alter transporter activity and thus metformin response. LKB, alias of serine-threonine kinase 11 (STK11); PGC-1α, peroxisome proliferator activated receptor γ coactivator 1 α; TORC2, target of rapamycin complex 2. 二甲双胍是怎样进入细胞并发挥作用的呢？我们知道二甲双胍是带正电荷的分子，需要细胞膜通道转运才能进入透过脂质双层分子膜。以往的研究仅发现二甲双胍进入细胞比较缓慢。在细胞水平研究发现，二甲双胍发挥作用可能需要2-7天完全进入细胞后才能体现出来。那么是哪种转运蛋白介导这一过程？ 这是OCT1即有机阳离子转运蛋白1 的分子结构，据研究二甲双胍在肝脏发挥作用需要它来转运。OCT2可能与二甲双胍在肾脏的排泄有关（下文将论及）。红点是OCT1的氨基酸多态性位点。OCT1的多态性决定了二甲双胍进入细胞的速度和数量，并决定个体对二甲双胍的治疗反应性。 Secondary structure and alignment of OCT1 with coding region SNPs. The transmembrane topology diagram was rendered using the transmembrane protein display software TOPO [S. J. Johns (University of California, San Francisco) and R. C. Speth (Washington State University, Pullman), transmembrane protein display software available at the University of California, San Francisco Sequence Analysis Consulting Group web site, /TOPO/topo.html]. Nonsynonymous amino acid changes are shown in red, and amino acid deletion is shown in blue. 过表达OCT1的HEX-OCT细胞较不表达OCT1的HEX细胞，二甲双胍的摄取明显增多，且可以被OCT1特异性阻断剂奎尼丁特异性阻断，同样，过表达OCT1的细胞细胞内二甲双胍的含量也是随时间而迅速增加的，在不表达OCT1的细胞，细胞内基本不能检测到二甲双胍。摄入细胞内的二甲双胍激活了下游的生物学效应，即AMPK-ACC。而在OCT1基因敲除的小鼠，其药物代谢动力学与表达OCT1的小鼠是一致，提示肾脏的排泄机制而不是肝脏的糖摄取决定二甲双胍的代谢动力学，有文献指出决定二甲双胍肾脏排泄的不是OCT1 ，而是肾脏的OCT2。然而基因敲除小鼠肝细胞内的二甲双胍比未敲除小鼠明显减低，生物学作用也是低下的。 Overexpressing human OCT1 in HEK293 cells increases metformin uptake