土著菌即自制em菌采集繁育方法.pdf

土著菌采集繁育方法 土著菌的概念： 土著菌就生活在我们周围的自然环境中，走进阔叶树林或竹林，在落叶且腐殖质多地方，扒 开树叶或杂草就可以看到细丝壮白色菌落，这就是有益的土著微生物。 土著微生物是多种有益微生物的混合群，土著微生物按好嫌气性分有好气菌、嫌气菌；按菌 种分有酵母菌、曲霉菌、放线菌、乳酸菌、芽孢菌等。 可以在不同的季节、不同的地点采集不同的菌种。采集到的原始菌种应放在室内阴凉、干燥 处保存。 土著菌采集方法 ： 1、采集地方：可以在当地山上落叶聚集较多的山谷、树林中采集。 2 、具体办法：把做的稍微有一点硬的大米饭 (1kg ～1．5kg) ，装入用干净杉木板做的小木箱 (25cm ×20cm× 10cm)约三分之一，大米饭上面盖上宣纸，封好口，将其埋在当地山上落叶聚 集较多的山谷树林中。为防止野生动物糟蹋，木箱最好罩上铁丝网。夏季经三～五天，春秋 经六～七天，周边的土著微生物潜入到米饭中，在米饭上形成白色菌落（放置时间稍长时会 形成各种颜色菌落，虽然也能利用，但最好还是用白色菌落） 。 3 、扩陪方法： 把变的稀软状态的米饭取回后装入坛子里 , 土著菌采集成功后掺入原材料量 1/3 左右的红糖，将其混合均匀 ( 数量按坛子容量的三分之一 ) ，把变的稀软状态的米饭装入坛子 里，盖上宣纸，用线绳系好口，放置在温度 18℃左右地方。大约放置 7 天左右，就会变成浓 稠液体状态， 饭粒多少会有些残留， 但不碍事。 简单过滤后就是土着微生物菌种原液。 用的 时候直接稀释后和 EM菌种原液一起使用！ 2 ）水田土著微生物采集方法 秋天，在刚收割后的稻茬上有白色液体溢出。把装好米饭并盖宣纸的木箱倒扣在稻茬上，这 样稻茬穿透宣纸接触米饭，很容易采集到稻草菌。约 7 天后，木箱的米饭变成粉红色稀泥状 态，同（ 1）方法，米饭与红糖以 2 ：1 比例拌匀装坛子、盖宣纸、系绳。 5-7 后内容物变成 原液（原原种） 。 以下步骤适用于菌种生产单位实验室！普通用户可以不做！ 4 、提纯复壮： 有条件的可以在实验室进行 一般情况下，采来的样品可以直接进行分离，但是如果样品中我们所需要的菌类含量并不很 多，而另一些微生物却大量存在。此时，为了容易分离到所需要的菌种，让无关的微生物至 少是在数量上不要增加，即设法增加所要菌种的数量，以增加分离的几率。可以通过选择性 的配制培养基（如营养成分、添加抑制剂等） ，选择一定的培养条件（如培养温度、培养基酸 碱度等）来控制。具体方法是根据微生物利用碳源的特点， 可选定糖、淀粉、纤维素，或者石油等，以其中的一种为唯一碳源， 那么只有利用这一碳源的微生物才能大量正常生长，而其他微生物就可能死亡或淘汰。对 G 一菌有选择的培养基 ( 如结晶紫营养培养基、红—紫胆汁琼脂、煌绿胆汁琼脂等 ) 通常含有 5%~10%的天然提取物。 在分离细菌时， 培养基中添加浓度一般为 50 μg ／m1的抗真菌剂 ( 如放 线菌酮和制霉素 ) ，可以抑制真菌的生长。 在分离放线菌时， 通常于培养基中加入 1~5m1天然 浸出汁 ( 植物、岩石、有机混合腐质等的浸出汁 ) 作为最初分离的促进因子，由此可以分离 出更多不同类型的放线菌类型； 放线菌还可以十分有效地利用低浓度的底物和复杂底物 ( 如几 丁质 ) ，因此， 大多数放线菌的分离培养是在贫脊或复杂底物的琼脂平板上进行的， 而不是在 含丰富营养的生长培养基上分离的；在放线菌分离琼脂中通常加入抗真菌剂制霉菌素或放线 菌酮，以抑制真菌的繁殖；此外，为了对某些特殊种类的放线菌