高三生物选修3复习大纲.doc

PAGE11 / NUMPAGES11 选修3、现代生物科技专题 专题1、基因工程 什么是基因工程？ 1.1 DNA重组技术的基本工具 一、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） ㈠来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 ㈡功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 ㈢结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，黏性末端和平末端。 二、“分子缝合针”——DNA连接酶 ㈠功能：将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子。连接部位：磷酸二酯键，不是氢键。 ㈡两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：⒈相同点：都缝合磷酸二酯键。⒉区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 ㈢与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 三、“分子运输车”——载体(与细胞膜上的载体有什么区别？) ㈠作为载体的必要条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入；具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择；对受体细胞无害、易分离。 ㈡最常用的载体是质粒：是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。㈢其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。 1.2基因工程的基本操作程序 一、目的基因的获取(什么是目的基因？) ㈠获取方法：原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。 ㈡从基因文库中获取目的基因 什么是基因文库？什么是基因组文库？什么是部分基因文库？三者间是什么关系？ 怎样从基因文库中获取目的基因？ ㈢利用PCR技术扩增目的基因 ⒈什么是PCR技术？⒉原理：DNA双链复制。⒊PCR技术需哪些必要条件？PCR的结果是什么？ ⒋过程：变性→退火→延伸→多次重复。㈣直接人工合成。 二、基因表达载体的构建（该过程实际上是不同来源的基因重组的过程，是基因工程的核心） ㈠构建基因表达载体的目的是什么？怎样构建？ ㈡一个基因表达载体的组成：复制原点＋启动子＋目的基因＋终止子＋标记基因 什么是启动子、终止子？它们分别在基因表达载体上的什么位置？各有什么作用？标记基因有什么作用？ 三、将目的基因导入受体细胞 ㈠转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 ㈡常用的转化方法 ⒈将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。导入到了植物细胞的什么位置？ ⒉将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。 ⒊将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的优点有哪些？最常用的原核细胞是什么？转化方法是什么？ ㈢重组DNA导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。 四、目的基因的检测和表达 ㈠首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因。方法：DNA分子杂交技术。该方法的原理是什么？ ㈡其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA。方法：用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。 ㈢最后检测目的基因是否翻译成蛋白质。方法：从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。 ㈣有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 1.3基因工程的应用 一、植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。 二、动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物、作器官移植的供体。 三、基因工程药物：细胞因子、抗体、疫苗、激素等。 四、基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥功能，多而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病的最有效的手段。 1.4蛋白质工程的崛起 一、天然蛋白质为什么不能完全适应生产和使用需要？实现蛋白质工程的基本途径是什么？ 二、蛋白质工程：指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质） 专题2 、细胞工程 什么是细胞工程？根据操作对象不同，可分为哪几种？ 2.1.1植物细胞工程的基本技术 一、理论基础（原理）：细胞全能性。 ㈠什么是细胞的全能性？在生物生长发育过程中，细胞为什么不会表现出全能性？ ㈡全能性表达的难易程度