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百合组织培养实验报告 实验原理 植物细胞全能性理论是植物组织培养的核心理论。立体细胞具有生命的特征属性，在全能性的基础上，提供合适的营养和环境条件，立体细胞经历脱分化（dedifferentiation）和再分化（redifferentiation）过程，可形成再生植物。 实验用品 实验材料：百合种球 实验仪器：高压消毒锅、超净工作台、镊子、剪刀、手术刀柄、手术刀片、酒精灯、定时器、人工气候箱、分析天平、酸度计、电炉、蒸馏水机、培养皿、烧杯、量筒、移液管、吸球、药匙、玻璃棒、锥形瓶、称量纸、滤纸、枪、枪头、试剂瓶、打火机、塑料膜、绳子 实验试剂：琼脂、蔗糖、75%，95%乙醇、α-萘乙酸（NAA）、6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1%升汞、盐酸、大量元素（磷酸二氢钾、硝酸钾、硝酸铵、七水硫酸镁、二水合氯化钙）、微量元素（四水合硫酸猛、七水合硫酸锌、五水合硫酸铜、二水合钼酸钠、碘化钾、六水合氯化钴、硼酸）、铁盐（乙二胺四乙酸二钠、七水合硫酸亚铁）、有机物（甘氨酸、盐酸吡哆辛、盐酸硫胺素、烟酸、肌醇） 实验操作步骤 用分析天平去8.8g琼脂，30g蔗糖，放入烧杯中，加蒸馏水至900ml，把烧杯放在电炉上煮琼脂，并用玻璃棒搅拌，时间为50-60分钟。 将煮好的琼脂加蒸馏水至900ml，按顺序用移液管加50ml大量元素，5ml微量元素，10ml铁盐，10ml有机物，再用枪加1ml6-BA，0.5mlNAA，并用玻璃棒搅拌。调ph至5.6-6.0之间。 将配好的培养基倒入锥形瓶中（50-60ml），用绳子将塑料膜绑好。准备蒸馏水，并将培养皿、手术刀柄、镊子用报纸包好，同培养基一起放入高压灭菌锅灭菌，温度为121℃，时间为23min。 灭完菌后将培养基放至室内，冷却。准备好洗净的百合种球，75%的酒精，0.1%升汞（注：升汞有剧毒，注意操作），定时器，手术刀片，烧杯等，准备进行无菌操作。 开启紫外灯30min，关闭10min后进入，用酒精擦拭无菌操作台，在手上喷洒酒精，将酒精灯点燃放入无菌操作台中，把酒精倒满烧杯，将镊子与手术刀放入烧杯中。 百合种球的灭菌方法：75%酒精泡1min→切成3段→用0.1升汞泡15min→用蒸馏水洗5次 接种方法：将灭好菌的百合种球四周切去，取中间部分切成2mm×2mm×0.5mm大小，将切好的百合快速放入培养基中，将培养基绑好。 将接好的百合培养基放入光照培养箱中进行培养。