新城疫病毒的鸡胚培养和病毒滴度检测教育课件.ppt

资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 一、目的要求 掌握鸡胚接种的常规方法； 学习NDV的分离培养及其鉴定方法。 二、背景知识介绍 病毒的鸡胚培养 鸡胚是正在发育的活体： 组织分化程度低； 细胞代谢旺盛； 适于许多病毒的生长增殖，尤其是禽类病毒。 鸡胚培养的优点： 来源充足； 价格低廉； 操作简单，无需特殊设备； 易感病毒谱较广； 对接种的病毒不产生抗体。 鸡胚培养的缺点： 非SPF鸡胚，可能含有某些家禽病毒的母源抗体，甚至还可能带有鸡白痢沙门氏菌、支原体、鸡白血病病毒、鸡贫血病毒等。 鸡胚接种的方法： 尿囊腔接种： 绒毛尿囊膜接种 卵黄囊接种 羊膜腔接种 静脉接种 鸡胚接种的方法： 尿囊腔接种 绒毛尿囊膜接种： 卵黄囊接种 羊膜腔接种 静脉接种 鸡胚接种的方法： 尿囊腔接种 绒毛尿囊膜接种 卵黄囊接种： 羊膜腔接种 静脉接种 鸡胚接种的方法： 尿囊腔接种 绒毛尿囊膜接种 卵黄囊接种 羊膜腔接种： 静脉接种 鸡胚接种的方法： 尿囊腔接种 绒毛尿囊膜接种 卵黄囊接种 羊膜腔接种 静脉接种 ： 新城疫病毒 副粘病毒科/副粘病毒亚科/禽腮腺炎病毒属。 新城疫的病原体。 形态： 病毒子多呈球形； 单股负股RNA； 核衣壳螺旋形对称； 有囊膜； 囊膜表面有纤突。 血凝性：可凝集人、鸡、豚鼠和小白鼠的红细胞。 病毒分离培养：9~11日龄鸡胚尿囊腔接种。 常规接种工具：注射器、打孔器、酒精灯等； 待接种的新城疫病毒材料； 9~11日龄鸡胚（1个/人）； 灭菌生理盐水； 其他： 镊子、照蛋器； 酒精棉球、碘酊棉球； 固体石蜡； 灭菌瓶子、灭菌吸管 等。 三、实验材料 四、实验内容 照胚： 取9~12日龄发育良好的鸡胚，观察气室及胚胎位置，标出气室底边，在无大血管处标出尿囊腔注射部位。 以尿囊腔接种为例，介绍新城疫病毒的接种方法： 消毒 气室向上放置鸡胚于卵架上； 先后用碘酊和酒精棉球消毒蛋壳所标记的位置。 打孔 在所标记注射部位用剪刀尖端打孔； 注意用力要稳，恰好使蛋壳打通而不伤及壳膜。 距气室底边0.5cm 注入病毒材料 用1mL注射器抽取接种物； 针头垂直刺入注射部位1-1.2cm即达尿囊腔内； 注入待接种的新城疫病毒：接种量为0.1~0.2mL。 封孔 用熔好的石蜡或消毒胶布封闭注射孔。 孵育与观察 气室朝上于37℃温箱中孵育； 以后每天检卵1~2次。 弃去24h内的死亡鸡胚： 机械损伤、细菌或霉菌污染等引起。 病毒的收获与鸡胚的观察 收集24h后死亡鸡胚，置4℃冰箱过夜，以免收获时流血; 取出冷却的鸡胚，消毒气室端卵壳表面； 用镊子击破气室部卵壳并去除壳膜，撕破绒毛尿囊膜； 以眼科镊镊住绒毛尿囊膜，用吸管吸取尿囊液，置无菌容器中保存备用。 一般能尿囊液6-10mL。 取出鸡胚胎，于平皿内观察胚胎有无病理变化，如出血、蜷缩、侏儒胚等。 新城疫病毒滴度的检测 血凝试验（HA） 凡能使鸡红细胞完全凝集的病毒最高稀释倍数,称为该病毒的血凝滴度。 六、思考题 鸡胚接种过程中，应该注意的问题？ 接种病毒后，24h内鸡胚死亡原因？ 如何判断新城疫病毒的血凝滴度？ 临床上还有哪些病毒具有血凝性？ 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * * * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作为科学依据，如有不当之处，请联系改正或者删除。 * 资料内容仅供参考，不能作