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用 Image-ProPlus(IP)
分析免疫组化图片
Mediacybernetics
1免疫组化图片分析原理
■根据染色染料颜色的深浅(光密度)及分布面积
大小来确定目标蛋白的量。
染色区域分布面积与目标蛋白量成正比。
■染色的颜色深浅(光密度)与目标蛋白量的定量
关系符合朗伯-比尔定律,是对数关系。
11光密度与灰度一迷惑人的不同概念
光密度:吸收光的物质的光学密度。( optical
density,就是常说的OD值)光密度值是直接与
染色物质的量相关的。
灰度:灰是不够黑,是反射亮度的单位。电子
照片上像素的亮度称为灰度。
Gray: between white and black
Example
1. the bright value on display screen is
gray value
2. The dark value on a white paper is
also the gray value.
black
gray=0
gray=256
Optical density
吸收光线的物质的光学密度
被测物质的量越多,光密度(OD值)越高,透射出的光越少,反
映在照片上就越黑。
■○D值与物质的量直接相关,灰度值与○D值成对数关系,符合
朗伯-比尔定律
理论上OD值是从零到无穷大。实际应用中,OD值的范围常用
0-2.0或者0-3.0。
black
white
OD=infinit
OD=0
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