实验二十一、酶的特性--底物专一性.docVIP

实验二十一、 酶的特性—底物专一性 1、目的要求? （1）了解酶的专一性。 （2）学会排除干扰因素，设计酶学实验。 2、实验原理? 酶的专一性是指一种酶只能对一种底物或一类底物（此类底物在结构上通常具有相同的化学键）起催化作用，对其他底物无催化反应。如淀粉酶只能催化淀粉水解，对蔗糖的水解并无催化作用。淀粉水解产物为葡萄糖，蔗糖水解产物为果糖及葡萄糖，这两种己糖的半缩醛基可与Benedict试剂反应，生成氧化亚铜的砖红色沉淀。 本实验以唾液淀粉酶（内含淀粉酶及少量麦芽糖酶）和蔗糖酶对淀粉及蔗糖的催化作用，观察酶的专一性。 3、试剂和器材 一、试剂 2%蔗糖；1%淀粉溶液（含0.3%氯化钠）。 本乃狄（Benedict）试剂：溶解85g柠檬酸钠和50gNa2CO3?2H2O于400mL蒸馏水中；另溶8.5g CuSO4?5H2O于50mL热水中。将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠－碳酸钠溶液中，边加边搅匀，如有沉淀可过滤除去，此试剂可长期保存。 二、材料 (1) 唾液淀粉酶溶液：先用蒸馏水漱口，再含10mL左右蒸馏水，轻轻漱动，约2分钟后吐出收集在烧杯中，即得清澈的唾液淀粉酶原液，根据酶活高低稀释50-100倍，即为唾液淀粉酶溶液。 (2) 蔗糖酶溶液：取1g干酵母放入研钵中，加入少量石英砂和水研磨，加50mL蒸馏水，静置片刻，过滤即得。 三、器材 试管1.5×15cm（×10），试管架；烧杯100mL（×1），200mL（×1）；量筒100mL（×1），10mL（×1）；玻璃漏斗；竹试管夹；水浴锅。 4、操作方法 检查试剂 取3支试管，按下表操作： 操作项目 0 1 2 1%淀粉溶液(mL) ? 3 ? 2%蔗糖溶液(mL) ? ? 3 蒸馏水(mL) 3 ? ? Benedict试剂(mL) 2 2 2 沸水浴煮沸2-3min 记录观察结果 ? ? ? 淀粉酶的专一性 取3 支试管，按下表操作： 操作项目 1 2 3 唾液淀粉酶溶液(mL) 1 1 1 1%淀粉溶液(mL) 3 ? ? 2%蔗糖溶液(mL) ? 3 ? 蒸馏水(mL) ? ? 3 摇匀置37度水浴保温15min Benedict试剂(mL) 2 2 2 沸水浴煮沸2-3min 记录观察结果 ? ? ? ? 三、蔗糖酶的专一性 取3 支试管，按下表操作： 操作项目 1 2 3 蔗糖酶溶液(mL) 1 1 1 1%淀粉溶液(mL) 3 ? ? 2%蔗糖溶液(mL) ? 3 ? 蒸馏水(mL) ? ? 3 摇匀置37度水浴保温15min Benedict试剂(mL) 2 2 2 沸水浴煮沸2-3min 记录观察结果 ? ? ? 5、思考题 1、观察酶专一性试验为什么要设计这3组实验？每组各有什么意义？ 2、请写出淀粉类型，结构和蔗糖的结构式？