武汉大学生物化学.pptVIP

Section 4. 核 酸 的 性 质 一、核酸的粘性 (Viscosity) 天然 DNA 溶液具有很高的粘性 , 但当 DNA 变性时其粘性急剧下降 . 根据大分字的粘度特征，高分子溶液比普通溶液的粘度大，不规则 线团比球状分子的粘度大，而线性分子的粘度比无规线团的大。当 DNA 在溶液中处于天然状态时，由于双螺旋的刚性以及长长的线性 结构，天然 DNA 的粘度很大，即使稀溶液其粘度也很大。 DNA 变性后， 由于双螺旋的刚性失去，氢键断开，两条链彼此分开，单链分子处 于随机卷曲状态，因而粘度急剧下降。因此， DNA 粘度的改变， 可 作为 DNA 分子变性的重要指标。 二、核酸的紫外吸收特征 核酸含有嘧啶碱和嘌呤碱基，因而 DNA 和 RNA 在紫外光区具有 吸收特性，其最大吸收在 260nm 处 。 利用核酸和蛋白质紫外吸收差别，可鉴定核酸制品中蛋白质杂 质。例如， 纯净的 DNA A260:A280 的比值大约介于 1.65 ～ 1.85. 若 比值过高，则表明污染有 RNA, 比值过低则表明有蛋白质或酚污染。 在核酸变性实验中，常引用摩尔磷消光系数。摩尔磷消光 系数是指含磷为 1.0 摩尔浓度的核酸水溶液在 260nm 处的消光值 , 用ε(p) 表示： ε(p) = A260／C·L = A260× 30.98 ／ W·L A: 被测核酸样品的消光值；