《细胞工程学》(实验)教学大纲.docVIP

《细胞工程学》（实验）教学大纲 课程代码：13.012 课程名称：细胞工程学（Cell Engineering） 学时学分：总学时56学时，实验课学时20学时；课程总学分3.5。 先修课程：普通生物学；细胞生物学；遗传学；细胞生物学；发育生物学。 实用专业：生物技术、生物学 一、课程性质和任务 细胞工程学是应用细胞生物学和分子生物学原理与方法，在细胞水平上研究改造生物遗传特性，以获得具有目标性状的细胞系或生物体的有关理论和技术的学科。它是一门现代生物科学理论和工程技术相结合的综合性学科。 细胞工程学是生物技术、生物学及生物工程*专业学生的必修专业课，也是我校其它生物类各本科专业学生的重要选修课。先修主要基础课程有普通生物学、发育生物学、遗传学、生理学、生物化学。 细胞工程是现代生物技术的重要组成部分，同时也是现代生物学研究的重要技术工具。要求学生通过本课程的学习掌握生物组织、器官及其细胞离体培养的原理与技术，为从事生物学领域的相关研究及其与细胞工程有关的生物技术产业奠定良好的理论和技术基础。 二、教学目标和要求 理论知识方面 重点掌握本学科的基本原理和基本技术即：细胞全能性学说在细胞工程中的指导作用；培养条件下的细胞分化和器官发生的调控；离体培养条件下的遗传与变异特点。掌握不同组织、器官的培养特点和控制方法。了解细胞工程的各类技术在现代生物学与生物技术领域的应用途径与发展潜力。 实践技能方面 重点掌握细胞工程的基本操作技术—无菌操作；掌握外植体选择、愈伤组织和胚状体诱导、器官发生调控等基本技术；了解细胞大批量培养方法，原生质体分离与体细胞杂交技术。 三、实验内容与学时分配 实验课总学时： 20 学时 实验名称 主要实验内容 实验学时 实验性质 主要试材及 仪器设备 细胞工程基础实验技术 目的：掌握培养基母液的配制方法；培养基的配制和灭菌技术；不同质地实验用品的灭菌方法。 内容：细胞工程实验室基本组成的了解和相关设备基本操作；培养基母液配制；愈伤组织诱导培养基配制；培养基灭菌。 4 必修 高压灭菌锅，加热磁力搅拌器或电炉（4-8台），天平，pH计（2-4台），培养基分装机（1-2套）。 无菌操作及愈伤组织诱导技术 目的：掌握植物外植体的消毒技术、离体培养的无菌操作和愈伤组织诱导技术。 内容：外植体选择、整理与灭菌；无菌操作室的消毒技术；外植体无菌接种（接种培养基为上次实验配制） 3 必修 超净工作台（4-8）台，小型电热石英砂消毒器（4-8个），温度控制培养箱（3台）。 器官发生与植株再生调控培养； 愈伤组织继代培养 目的：了解离体培养中形态发生途径与过程 内容：愈伤组织诱导结果的调查与统计；了解分化培养基特点与配方；将上次实验诱导的愈伤组织一半转入分化培养基中；将上次实验诱导的愈伤组织另一半转入愈伤组织继代培养基中。培养基均预先准备。 3 必修 同上，光照/温度控制培养室。 细胞悬浮系的建立 目的：了解细胞悬浮系建立的全过程。 内容：利用第二次实验继代培养的愈伤组织进行细胞悬浮培养操作：包括单细胞制备；接种、细胞继代等。 2 必修 超净工作台（4-8）台，小型电热石英砂消毒器（4-8个），温度摇床（4台）。 原生质体分离与体细胞杂交 目的：初步掌握植物原生质体分离和细胞杂交的方法。 内容：利用上次实验培养的植株叶片和悬浮细胞，分离原生质体；利用分离的原生质体进行细胞融合实验 6 必修 超净工作台，低速离心机（4台），倒置显微镜，电融合仪 实验结果调查、分析、课程论文写作 目的：掌握离体培养结果的观察、数据处理及科学论文写作的基本方法。 内容：对第二次实验中接种到分化培养基中个体再生结果进行调查统计，对第5次实验细胞悬浮培养的结果进行检测。统计结果用于课程论文写作；讲解论文写作方法与要求。（论文写作不在课时中） 2 必修 天平；倒置显微镜；体视显微镜；多媒体设备等。 植物茎尖脱毒与病毒检测 目的：掌握植物茎尖脱毒的基本操作程序， 内容：利用马铃薯芽剥离茎尖培养；对培养植株采用ELASA技术进行病毒检测 课外选修 倒置显微镜；酶联仪等 植物离体诱导开花 以矮牵牛为材料，通过不同诱导条件观察成花条件 课外选修 超静工作台；光照培养室（箱） 四、教学方式及考核办法 教学方式：主要采用在教师示范的基础上，学生自主操作、教师分别指导为主。 考核办法：本课程实验设置基本按照本学科研究的基本环节设计，因此，整个教学环节实行模拟研究型方式，每次实验学生进行详细观察记载，实验结束后形成完整实验资料，在此基础上撰写实验论文，作为实验考核的主要依据；同时，每次实验由指导老师对操作环节进行等级评定。最后的实验成绩按照操作成绩和论文成绩综合评分。 五、主要参考书： 细胞工程实验操作指南 柳 俊编 In Vit