白玉蜗牛与土壤（微）塑料的相互影响.pdfVIP

华东师范大学硕士学位论文 摘要 塑料制品的广泛使用与回收管理不善已经导致全球性塑料污染问题，土壤则 是大量塑料垃圾的蓄积地。土壤中的塑料会破碎或降解成更小的塑料碎片，尺寸 小于5 mm 的塑料残片称为微塑料，是近年来倍受关注的新型污染物。以往较多 的研究关注于海洋环境中的微塑料，而对陆地土壤环境中微塑料的环境归趋和生 态风险还知之甚少。土壤动物有很多机会接触土壤中的塑料碎片，是否会通过摄 食和消化来影响微塑料在土壤中的归趋，并诱发动物的毒性效应，还鲜有研究报 道。此外，尚不清楚土壤动物是否具备降解土壤中残留塑料的能力。 本文选择常见的土壤无脊椎动物白玉蜗牛（Achatina fulica ）作为实验对象， 使用聚对苯二甲酸乙二酯（PET ）微塑料纤维（MFs ，平均长度和平均直径分别 为1257.8 μm ，76.3 μm ）和聚苯乙烯（PS ）泡沫为实验材料，观察动物对（微） 塑料的摄食、代谢和排出，分析（微）塑料对蜗牛生长发育、组织病理和氧化应 激相关酶活的影响；通过体视显微镜镜检、扫描电子显微镜（SEM）观察、凝胶 1 色谱分析（GPC ）、傅里叶变换红外光谱（FTIR ）和质子核磁共振（H NMR ）对 比分析排出粪便中残留的和原（微）塑料的表面形态、粒径分布、分子量、基团 结构变化，从而分析土壤动物和（微）塑料的相互影响。主要结果如下： （1）尼罗红染色的PET 微塑料纤维喂食白玉蜗牛5 小时，在5、10、12、 24 小时后分别在食道、胃、前肠和后肠观察到微纤维的大量积聚，它们在48 小 时后完全排出体外。扫描电镜显示，微塑料纤维经消化排出后表面出现明显裂纹 和腐蚀痕迹，且被排出体外的微塑料纤维的直径较摄食前显著性地减小了 10.81±6.26% （p 0.001）。 （2 ）蜗牛在浓度分别为0.01、0.14、0.71 g kg-1 的微塑料纤维模拟土壤暴露 28 天后，均未观察到蜗牛死亡。与对照组比较，中高浓度的微塑料纤维暴露使蜗 牛摄食量平均减少24.7-34.9%，排泄量显著减少46.6-69.7%，但未观察体重、壳 长和壳口直径与对照组的明显差异。通过主要器官的组织病理学切片分析，发现 I 华东师范大学硕士学位论文 高浓度组40% 的蜗牛的胃肠道组织受到损伤，表现为胃肠壁绒毛缩短或破裂，但 对肝组织和肾脏没有明显的损伤效应。另外，高浓度组蜗牛肝组织的谷胱甘肽过 氧化物酶（GPx ）活性下降了59.3±13.8%，总抗氧化能力（T-AOC ）下降36.7±8.5%， 脂质过氧化指数（MDA ）上升58.0±6.4%，均与对照组具有显著性差异，表明微 纤维引起机体氧化应激。 （3 ）经过为期4 周的PS 泡沫板和油麦菜联合喂食实验后，每只蜗牛平均摄 食 18.5±2.9 mg 的PS ，对所有粪便经30%H O 消解和过滤提取PS ，其中PS 残 2 2 留量为每只蜗牛 12.8±1.1 mg ，通过质量核算后测定摄入的30.7%的PS 被消化。 对粪便中PS 进行形态尺寸统计，粒径分布在0.146-3.1 mm 之间。摄食PS 的蜗 牛体重、壳长和壳口直径与对照组相比没有异常变化。GPC 分析表明粪便残留的 Mw 值从摄食前的 234,500 Da 增长到 250,300 Da, Mn 值从 92,000 Da 增长到 1 106,000 Da，这说明PS 在蜗牛体内发生有限的解聚。FTIR 和 H NMR 的分析结 果显示，蜗牛体内形成了氧化中间体和化学修饰官能团，如碳碳双键（−CH=CH− ）、 羰基（H C=O ）和羟基（−OH ）等新基团出现。 2 （4 ）预先对蜗牛进行五天的土霉素喂食后，其肠道菌群数量下降两个数量 级，然后进行同前的泡沫板喂食4 周，残留粪便的PS 分子量也发生了