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摘 要i
Abstractiii
1 文献综述 1
1.1 鲁氏酵母 1
1.2 谷胱甘肽的性质及其生理作用2
1.2.1GSH 基本性质2
1.2.2 GSH 的生理作用3
1.3 国内外研究进展3
1.3.1 高糖胁迫条件下酵母细胞的自我生理调控作用4
1.3.2 多组学技术在微生物中的应用现状5
1.3.3 谷胱甘肽代谢途径在酵母细胞中抗氧胁迫系统中的作用6
1.4 课题的研究目的及意义6
1.5 研究内容及技术路线7
1.5.1 研究内容7
1.5.2 技术路线8
2 材料与方法9
2.1 试验材料9
2.1.1 菌株与培养基9
2.1.2 主要试剂9
2.1.3主要仪器设备 10
2.2 试验方法11
2.2.1 鲁氏酵母的扩培及试验设计11
2.2.2 生长曲线及形态观察11
2.2.3 抗氧化酶、丙二醛和细胞膜相对电导率的测定11
2.2.4D-果糖胁迫下鲁氏酵母细胞转录组测序分析14
2.2.5D-果糖胁迫下鲁氏酵母无标记定量蛋白质组学分析15
2.2.6D-果糖胁迫下鲁氏酵母谷胱甘肽合成途径中间代谢产物的测定15
2.2.7 荧光定量PCR 验证差异表达基因16
i
鲁氏酵母通过谷胱甘肽代谢途径响应D-果糖胁迫的分子机制研究
2.2.8GSH-Px 全长基因的生物信息学分析方法19
2.2.9 数据分析处理 19
3 结果与分析21
3.1D-果糖胁迫对鲁氏酵母生长曲线及形态的影响21
3.1.1D-果糖胁迫对鲁氏酵母生长曲线的影响21
3.1.2D-果糖胁迫对鲁氏酵母细胞形态的影响22
3.2D-果糖胁迫对鲁氏酵母抗氧化能力以及抗氧化酶基因的表达分析24
3.2.1D-果糖胁迫对鲁氏酵母丙二醛含量和细胞膜相对电导率的影响24
3.2.2D-果糖胁迫对鲁氏酵母抗超氧阴离子自由基的影响25
3.2.3D- GSH-Px CAT SOD POD 26
果糖胁迫对鲁氏酵母 、 、 和 酶活的影响
3.2.4D-果糖胁迫下鲁氏酵母转录组测序差异表达基因分析27
3.2.5D- GSH-Px CAT SOD POD 30
果糖胁迫对鲁氏酵母 、 、 和 基因表达量的影响
3.3D-果糖胁迫对鲁氏酵母谷胱甘肽代谢途径的影响31
3.3.1D-果糖胁迫对鲁氏酵母碳代谢中枢通路相关基因编码酶表达的影响31
3.3.2D-果糖胁迫对鲁氏酵母谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸合成关键基因表达量的影
响32
3.3.3D-果糖胁迫对鲁氏酵母合成及代谢谷胱甘肽关键基因表达量的影响33
3.3.4D-果糖胁迫对鲁氏酵母参与合成谷胱甘肽代谢通路中蛋白表达量的影响
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