UV紫外分光光度计检定规程.doc

PAGE 紫外可见光分光光度计检定规程 适用范围 适用于756CRT紫外可见光分光光度计的检定。 职责 计量管理员：严格按检定规程进行周期检定。 QC主管：监督检查执行情况。 检定项目和技术要求 波长准确度≤±1nm；波长重复性≤0.5nm。 稳定性：亮电流0.5%τ/5min ，暗电流0.2%τ/5min。 吸收度准确度：吸收系数的相对偏差≤±1%。 杂散光＜0.8%。 吸收池配对误差≤0.5%。 检定条件 环境条件 室温为10~30℃，相对湿度小于65%。 工作台不受阳光直射，室内应无腐蚀性或其它影响测定的气体干扰。 周围无影响检定的强电场、磁场和强烈震动。 仪器检定前，需先开机预热半小时。 检定设备、试剂 笔式低压汞灯、钬玻璃校正片 重铬酸钾（基准用）、硫酸（分析纯）、碘化钠（分析纯）、亚硝酸钠（分析纯） 检定方法 波长准确度与重复性的检定 新安装或修理后的仪器，为避免其标示波长与实际波长相差太大，使检定困难，检定前应先将仪器波长调至589nm，狭缝置1nm，用眼睛观察样品室光路中钨灯的钠光D线，应为桔黄色。如颜色相差太大，应先调整好仪器的波长，再进行检定。 氘灯的两条谱线656.1和486.0nm是最常用的检定波长。方法：点亮氘灯，将波长置于656nm±20nm处，调小狭缝或调负高压，使透光率在10%左右，慢慢地往返转动波长旋纽，记录透光率最大或指针摆幅最大时的波长。复测三次，取三次平均值与656.1比较，即为波长准确度的误差。三次测定值与平均值的最大差值，即为波长重复性的误差。然后再用同样的方法测定486.0nm。计算波长准确度和波长重复性误差，应以两条谱线最大差值表示。 由于使用上述氘灯谱线检定波长均在可见光域区，而汞灯在紫外—可见光区有多条谱线可用于检定，因此有条件时最好使用低压汞灯。汞灯较强谱线的波长有253.65、296.73、313.16、365.02、404.66、435.84和546.07nm。用汞灯检定波长范围宽，但在检定时须将汞灯置于光路中适合位置。检定方法与氘灯检定相同。 用已知最大吸收波长的校正片，如钬玻璃、镨铋玻璃等是最简便的波长准确度和波长重复性的检定方法。只需将玻片放入样品光路中，以空气为空白，按测定吸收图谱方法测定即可。但由于玻片的制作工艺和使用条件，有时会出现微小的误差，使用时必须注意。 稳定性的检定 检定时可先将波长置250nm（用氘灯），调透光率为100%，记录2分钟的光电流变化情况。然后在将挡光块插入样品光路，记录2分钟的暗电流变化，并与规定值比较。 将波长置于450nm处（用钨灯），按5.2.1同样方法测定记录光电流和暗电流变化情况与规定值比较。 吸收度准确度的检定 取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，置1cm石英池中，用0.005mol/L硫酸溶液作参比。按下表规定的波长处分别测定吸收度并计算其吸收系数。重复测定三次，取其平均值与规定的吸收系数比较，计算其相对偏差（规定±1%）。 波长（nm） 235（最小） 257（最大） 313（最小） 350（最大） 吸收系数 125.5 144.0 48.62 106.6 测定时应先选择配对吸收池，盛参比溶液，在规定的各波长处做配对检验，必要时应扣除池间的误差。 杂散光的检定 取1%碘化钠溶液，以水为空白，在220nm的波长处（用氘灯）测定其透光率，记录其测定值并与规定值比较（＜0.8%）。 取5%亚硝酸钠溶液，以水为空白，在340nm的波长处（用钨灯）测定其透光率，记录其测定值并与规定值比较（＜0.8%）。 测定前应将挡块插入样品池，校正仪器零点。其透光率应为0.0%。 吸收池配对误差的检定 取洗净的石英吸收池盛水，在220nm处，以其中一只调透光率为100%，再分别更换其它吸收池，测其透光率，凡误差在规定范围内的，再分别装入0.006%重铬酸钾0.005mol/L硫酸溶液，在350nm处，以其中一只调透光率为100%，分别测定其它吸收池，凡透光率均在规定范围以内的即为配对的吸收池。 取洗净的玻璃吸收池盛水，在660nm处，以其中一个为100%透光率，分别测定其它的吸收池，凡透光率误差在规定范围内的吸收池再分别装入0.006%重铬酸钾的0.005mol/L硫酸液，在400nm处以其中一个为100%透光率，分别测定其它吸收池，凡透光率误差均在规定范围以内者即为配对的吸收池。 由于吸收池在不同波长吸收度有少许的改变，在使用时，最好先测定配对误差，必要时应扣除。 检定结果处理和检定周期 检定结果全部项目均符合技术要求者，判为合格，方可使用。若个别指标达不到要求，却难以维修而又不影响定性、定量结果准确性者，可作为准用品。 仪器检定周期为一年，仪器如经搬动、修理