K210 食品微生物检验技术、K209 农产品微生物检验技术 W4301沙门氏菌与检验方法概述、W4301-沙门氏菌与检验方法概述 KJ01 国内外的沙门氏菌检测方法介绍.pptVIP

国内外的沙门氏菌检测方法介绍 沙门氏菌（Salmonella） 一群形态、培养、生化反应和抗原构造相类似的革兰氏阴性杆菌，种类繁多。已发现2000多个种（或血型）。 DANIEL ELMER SALMON, (1850-1914)美国兽医微生物和病理学家。是美国 授予的第一位兽医学博士。1884年任美国农业部畜牧局 首任局长。他首次从病猪中分离出猪霍乱沙门氏菌。在 医学微生物中通用的沙门氏菌一词，就是为纪念他而以 他的名字命名的。 革兰氏阴性杆菌，需氧或兼性厌氧，最适生长温度为35～37℃，最适pH值为6.8～7.8。 不分解乳糖（亚利桑那菌除外）。分解葡萄糖产酸产气（伤寒沙门氏菌产酸不产气）。多数产生H2S，不产生靛基质，不液化明胶，不分解尿素，不产生乙酰甲基甲醇，多数能利用枸橼酸盐，能还原硝酸盐为亚硝酸盐，在氰化钾培养基上不生长。 沙门氏菌主要生物学性状 三糖铁 TSI 尿素酶试验 右为阳性（红） 左为阴性对照（黄） 吲哚试验 右为阳性（液面红） 左为阴性对照（液面黄） VP试验 左为阳性 右为阴性对照 赖氨酸脱羧酶试验 从左往右依次为 对照、阳性（紫）、阴性（黄） 丙二酸盐试验 左侧为阳性（兰） 右为阴性对照（绿） ONPG试验 左为阳性（黄） 右为空白对照 国内外沙门氏菌检测方法（传统方法） 国家标准GB 4789.4-2003 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验 行业标准SN 0170-92 出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法 FDA （Food Drug Administration） 细菌学分析手册（BAM） 第5章 沙门氏菌属 AOAC (Association of Official Analytical Chemists) 官方方法 967.25-967.28 FSIS （FOOD SAFETY AND INSPECTION SERVICE） 微生物实验室手册 第4.02章 肉、禽和蛋品中沙门氏菌的分离和鉴定 ISO 6579:1993(E) 微生物－沙门氏菌检测的通用方法 ISO 6785-1985(E) 牛奶和奶制品-沙门氏菌的检测 加拿大官方食品微生物分析方法食品中沙门氏菌的分离和鉴定手册 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.4-2003 冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品 鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品 前增菌法 25g＋BPW225mL 36 ℃ ± 1 ℃ 一般4h，干蛋品18h～24h 10mL＋MM （或TTB）100mL 10mL＋SC100mL 直接增菌法 25g＋灭菌生理盐水25mL 检样匀液25mL ＋MM （或TTB）100mL 检样匀液25mL ＋SC100mL BS DHL（或HE、WS、SS） TSI（排除A/A H2S－结果 ），靛基质，尿素，KCN，赖氨酸 H2S＋ 靛－ 尿－KCN－ 赖＋（或一项不符） 沙门氏菌血清学试验 甘露醇 山梨醇 H2S＋ 靛＋ 尿－ KCN－ 赖＋ H2S－ 靛－ 尿－ KCN－ 赖＋/－ 非如左述的各种反应结果 沙门氏菌血清学试验 ONPG － 沙门氏菌 非沙门氏菌 42 ℃ 18h～24h 36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h 42 ℃ 18h～24h 36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h 36 ℃ ± 1 ℃ 40h～48h 36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h 检验检疫行业标准 出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法SN 0170－92 肉类、蛋品 缓冲胨水（BPW） 四硫磺酸盐煌绿（TTB） 亚硒酸盐胱氨酸（SC） 37 ℃ 4h or 20～24h 直接选择性增菌 亚硒酸盐胱氨酸（SC） 四硫磺酸盐煌绿（TTB） 37 ℃ 24± 2h BS DHL (亚利桑那菌琼脂) 前增菌 37 ℃ 24～48h TSI 赖氨酸脱羧酶 TSI 尿素酶 37 ℃ 24～48h 生化试验 血清学试验 （“O”抗原，“Vi”抗原） 42 ℃ 20 ± 2h 37 ℃ 24～48h 结果判定 细菌学分析手册 （BAM） 第五章 沙门氏菌属 样品（20类）25g 225mL 乳糖肉汤（LB）or 胰酪胨