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微生物检测设备的使用和注意事项 江帆 显微镜的使用和注意事项 1、显微镜的结构介绍 2、显微镜的使用 3、显微镜的维护 压力灭菌器的使用和注意事项 1、压力灭菌器的结构介绍 2、 压力灭菌器的使用 3、 压力灭菌器的灭菌效果验证 4、 压力灭菌器的注意事项 微生物实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。 仪器应分门别类合理安放，消毒灭菌的仪器、配制培养基的仪器应和处理实验废弃物的仪器设备分开区域放置，以防交叉污染。 显微镜 显微技术是微生物检验技术中最常用的技术之一。显微镜的种类很多，在实验室中常用的有：普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。而在微生物检验中最常用的还是普通光学显微镜。 显微镜 显微镜 暗视野显微镜的聚光镜中央有挡光片，使照明光线不直接进人物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至 4~200nm的微粒子，分辨率可比普通显微镜高50倍。 暗视野显微镜的基本原理是丁达尔效应。当一束光线透过黑暗的房间,从垂直于入射光的方向可以观察到空气里出现的一条光亮的灰尘“通路”。 显微镜 相差显微镜是用于观察未染色标本的显微镜。活细胞和未染色的生物标本，因细胞各部细微结构的折射率和厚度的不同，光波通过时，波长和振幅并不发生变化，仅相位发生变化（振幅差），这种振幅差人眼无法观察。而相差显微镜通过改变这种相位差，并利用光的衍射和干涉现象把相差变为振幅差来观察活细胞和未染色的标本。 显微镜 荧光显微镜是以紫外线为光源， 用以照射被检物体， 使之发出荧光， 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光。 显微镜 一、使用 1、低倍镜观察（10倍物镜、20倍物镜） 先将低倍镜位置固定好 放置标本片，转动反光镜，调好光线，将物镜提高，向下调至看到标本。 细调对准焦距进行观察。 显微镜 2、高倍镜观察（40倍物镜以上） 显微镜的设计一般是共焦点的。低倍镜对准焦点后，转换到高倍镜基本上也对准焦点，只要稍微微调即可。 不是共焦点的显微镜，将高倍物镜下移值肉眼观测到最接近玻片处，再向上调准焦点。 显微镜 3、油镜的使用方法 将镜筒升高，在玻片中加一滴香柏油 粗调旋钮降下镜筒，直至油镜的前透镜浸没在油中。 从目镜中观察视野，同时用微调旋钮缓缓提升镜筒，直至视野出现清晰物象。 油镜用毕要及时将香柏油擦拭干净，勿使干涸。先用干净的擦镜纸擦拭1～2次，再用滴有乙醚混合物（乙醚与乙醇的体积比为7:3）的擦镜纸擦两次，最后再用干净的擦镜纸完全擦干。 显微镜 二、维护 观察液体标本时，一定要加盖玻片。 用过油镜的，先用干净的擦镜纸擦拭1～2次，再用滴有乙醚混合物（乙醚与乙醇的体积比为7:3）的擦镜纸擦两次，最后再用干净的擦镜纸完全擦干。 最好能以无镜头的一侧对着镜台，如装满物镜，则以低倍镜对着镜台。 将镜身下降到最低位置，调节好镜台上标本移动器的位置，罩上防尘套。 显微镜 镜头要保持清洁，只能用擦镜纸擦拭。擦镜纸要放在纸盒中，以防沾染灰尘。切勿用手绢或纱布等擦镜头。 不要在阳光直射、高温或高湿、多尘以及容易受到剧烈震动的地方使用显微镜，环境温度要求为5～40℃，最大相对湿度为80%。 在移动仪器时，要确保电源关闭仪器各组件的连接状况稳定，小心拿稳主机进行移动。 保持良好的散热，保持电源器与灯室之间至少10cm的距离。 清洁各种玻璃部件时，用纱布轻轻擦拭。除掉指纹或油渍，要用少量乙醚（70%）和乙醇（30%）混合液沾湿纱布擦拭。对于显微镜非玻璃组件，不要使用有机溶剂擦拭。可以用干净布进行擦拭。 高压蒸汽灭菌器 高压蒸汽灭菌器 一、表压力和绝对压力 压力的表示有两种方法，一种是表压力，另一种是绝对压力。 用表压力表示 表压力是指压力表上直接指示的压力值，而压力表上所指示的压力值是指容器内部的压力与容器周围大气压力的差值，这个压力值称为“表压力”（用P表表示）。“P表”只是表明容器内部的压力与容器周围大气压力的差值，所以是一个相对值。表压力是以当时当地大气压力值为测量起点的。 高压蒸汽灭菌器 用绝对压力表示 绝对压力是指实际作用在容器内器壁上的压力，即压力表上的指示的压力再加上容器周围的大气压力，这个绝对真实的压力称作“绝对压力(用“P绝”表示)。由于大气压力近似等于0.1MPa，故P绝≈P表＋0.1MPa。绝对压力是以压力等于零为测量起点的。 高压蒸汽灭菌器 二、使用 操作步骤 1、打开水箱盖，