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- 2020-08-29 发布于天津
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CFSE 标记细胞及测定细胞增殖
以小鼠 CD4 T 细胞为例
Buffer A :PBS+0.1%BSA ,过滤灭菌
分离小鼠脾细胞
MACS 法分离小鼠 CD4+ T 细胞
用 buffer a 重悬细胞,细胞浓度为 1*107 /ml
加入 CFSE ,终浓度为 5 M
37 度孵育 10 min
补加含血清的 1640 10 ml
冰上 5min
1000 rpm 离心 5min
再加入含血清 1640 10 ml , 1000 rpm 离 5min 如此重复 2 次
细胞用含血清 1640 重悬即可
当用流式细胞仪测定细胞增殖时,选用 FL1 通道检测,测定前还可用 FL1 以外的荧光染料
对细胞进行标记 (如 anti-CD4 PE, anti-CD3 PE/Cy5 )
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