斐林试剂和双缩脲试剂区别.pdfVIP

. 斐林试剂和双缩脲试剂区别 1、试剂的浓度和配制方法不同 斐林试剂：甲液： 0.1g/mL 的 NaOH 溶液；乙液： 0.05g/mL 的 CuSO4 溶液。 使用前临时配制，在 2mL 的甲液中滴入 4 滴～ 5 滴乙液，振荡使混合均匀后即可。 双缩脲试剂： A 液： 0.1g/mL 的 NaOH 溶液； B 液： 0.01g/mL 的 CuSO4 溶液。 分别配制好 A 液和 B 液即可。 2、试剂的作用和鉴定原理不同 斐林试剂： 作用：可鉴定可溶性还原糖。 原理：甲液和乙液混合后产生 Cu(OH) 2 沉淀， Cu(OH )2 与含醛基（— CHO ）的可溶性 还原糖，在加热条件下反应，将 Cu(OH ) 2 还原为砖红色的 Cu 2O 沉淀。 双缩脲试剂： 作用：可鉴定蛋白质溶液。 原理：在碱性溶液（ NaOH ）中，双缩脲（ H 2 NCO NH CONH 2 ）能与 Cu 2 反应， 形成紫色络合物。由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键（— CO— NH —）， 因此，蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而使溶液呈现紫色。 3、试剂的使用方法不同 斐林试剂： 使用时现配现用， 要水浴加热。 如果斐林试剂放置一段时间， 因 Cu(OH) 2 沉 淀在溶液底部而无法使用。 使用时， 甲液和乙液不可分别加入到待测液中， 否则，待测液 （苹 果组织样液）中的有机酸会中和 NaOH ，使产生的 Cu (OH ) 2 不足而影响鉴定。 双缩脲试剂： 使用时， 双缩脲试剂 A 液和双缩脲试剂 B 液要分别先后加入到待测液中， 不需要加热。双缩脲试剂 A 液和双缩脲试剂 B 液不可以混合后再加入待测液。如先混合， 则会产生 Cu (OH )2 沉淀而无 Cu2 产生。加入的双缩脲试剂 B 液（ CuSO4 ）也不能过量， . . 否则蓝色的 Cu (OH )2 会遮盖产生的紫色。 4、反应中出现的颜色不同 斐林试剂鉴定可溶性还原糖，出现的颜色变化为：浅蓝色→棕色→砖红色。 待测液加入刚配制的斐林试剂，溶液是浅蓝色；水浴加热后，一部分 Cu (OH ) 2 被还原 为砖红色的 Cu 2 O ，溶液呈现两种颜色的混合色——棕色；随着反应的完成， Cu(OH) 2 全 部被还原为 Cu 2 O ，溶液呈砖红色。 双缩脲试剂鉴定蛋白质，出现的颜色变化为：无色→浅蓝色→紫色。 加入双缩脲试剂 A 液，溶液无色；再加入双缩脲试剂 B 液，有 Cu2 形成，溶液呈浅蓝 色；振荡均匀后，反应完成，溶液呈紫色。 .