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(精品课件)尿液理学 蛋白 本周蛋白 尿糖 检测试验.ppt

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【干扰因素】 干 扰 因 素 假阳性 ①高浓度尿酸、尿酸盐、草酸盐 ②碘造影剂、大剂量青霉素 ③混入生殖系统分泌物 假阴性 pH 9 或 3 * 【注意事项】 1 .标本:①尿液明显混浊,先离心或过滤。 ②患者应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含 碘造影剂时,应告知结果可能产生假阳性。 ③正确采集中段尿,避免混有生殖系统分泌物。 2. 调pH 本法在尿液偏碱或偏酸时(pH>9 ,pH<3)可呈 假阴性,检测前先测试尿pH(5~6). 3.掌握好结果判断时间,对于微弱阳性的判断,可选用黑色衬纸作背景,以提高分辨力。 * 第三节 尿本周蛋白定性检查 一、凝溶法 【原理】 本周蛋白在pH4.9±0.1条件下,加热至 40℃~60℃时可发生凝固,温度升至90℃~100℃时沉淀消失,当温度降低恢复至40℃~60℃时又可重新凝固。 * 【操作】(详见实验课本 P90 ) 1.标本处理 2.加入试剂 3.观察结果 4.验证结果 * 【注意事项】 1.收集已诊断轻链疾病患者的尿液做此试验。尿液新鲜,减少清蛋白、球蛋白分解变性产生的干扰。混浊尿液须先离心取上清液。 2.严格控制或调节pH,凝溶法最适pH为4.5~5.5。 3.煮沸过滤时,动作迅速,保持高温,不要振荡,防止BJP夹杂于其他沉淀蛋白中被过滤除掉而造成假阴性。过滤用漏斗、滤纸、试管等用品,需保持高温状态,以避免温度降低使BJP凝固。 4.凝溶法特异性高,操作繁琐、费时,灵敏度低(0.3~2.0)g/L。 5.操作时一定注意安全!! * 二、对-甲苯磺酸法 【原理】 对-甲苯磺酸能沉淀相对分子质量较小的本周蛋白,而对相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不起反应。 * 【操作】 1.加尿液: 取2支试管,分别加尿液1ml 2.加试剂: 测定管加0.5ml试剂,对照管加 0.5ml冰醋酸,轻混匀静置5min 3.观察结果: ①阳性:测定管浑浊加重或有沉淀,对照管清晰透明或轻度浑浊 ②阴性:测定管清晰透明或与对照管相似 * 【注意事项】 1.收集已诊断轻链疾病患者的尿液做此试验。尿液应新鲜,混浊尿液须先行离心取上清液。服用利福平类抗结核药物患者可能出现周蛋白假阳性。 2.尿液中其他球蛋白>5.0g/L可出现假阳性,需进行验证。如果尿液中本周蛋白含量低,则需先对尿液进行浓缩。 * 第四节 尿葡萄糖班氏法定性检查 【原理】 Cu2+-----------→Cu+ 蓝色 黄色至砖红色. △ 简易步骤:班氏试剂1ml(煮沸不变色)+尿4滴→煮沸1-2min →冷却后观察. 碱性条件+葡萄糖 * ?操作:1ml班氏试剂,加热试管底部,煮沸,观察,再加尿液2滴,继续煮沸1~2min,冷却后观察结果。 ?结果判断: 1.蓝色不变 : - 2.蓝中略带绿无沉淀 : +/- 3.绿色有少许黄绿色沉淀 : + 4.较多黄绿色沉淀 : ++ 5.土黄色浑浊,大量沉淀 : +++ 6.大量红棕/砖红色沉淀 : ++++ * 【干扰因素】 标本因素 假阳性:还原性糖 假阴性:①大量铵盐,预先加碱煮沸 去氨后再检验; ② 蛋白>0.5g/L,加热乙酸法去蛋白取滤液检验; 药物因素 假阳性:VitC,青/链霉素,头孢菌素,异烟肼,水杨酸盐,氨苄西林 【评价】 缺乏特异性,灵敏度低 * 【注意事项】 1、试剂与尿液的比例为10︰1。 2、煮混时应不时摇动试管以防爆沸喷出,试管口朝向无人处。 3、检验糖尿病患者尿液中葡萄糖,空腹或餐后2h留取尿标本。 4、大量铵盐,易致假阴性,应预先加碱煮沸去氨后再检验。 5、蛋白>0.5g/L,易致假阴性,加热乙酸法去蛋白取滤液检验。 6、VitC,青/链霉素,头孢菌素,异烟肼,水杨酸盐,氨苄西林等 药物易致假阳性,应停药一段时间再行检测。 * 【实验报告格式】 一、实验原理 二、器材与试剂 三、操作步骤 四、实验结果与分析(实验报告的重点内容,具体分析自己所做的实验结果,结果与书本原理不相符时,到底什么原因自己要去思考分析) 五、注意事项

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