RT-PCR技术原理简介 .pptVIP

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2020-09-02 发布于江西
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RT-PCR技术原理简介 RT-PCR简介 RT- PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）即逆转录PCR RT-PCR是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。 RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。 RT-PCR原理掌握PCR技术。学会操作RT-PCR简介PCR仪。熟悉琼脂糖凝胶电泳技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。 RT-PCR两种方法 RT-PCR反应体系 RT引物的选择 RT逆转录酶的选择 RT-PCR操作流程 1.从细胞或特定组织中提取总RNA； 2.逆转录实验； 3.扩增内参和目的基因并比较基因表达差异。实验流程（两步法）实验流程（一步法） RT实验要素—决定特异性和灵敏度